蒙药地格达属的指纹图谱比较研究

道日娜

(内蒙古自治区阿拉善盟蒙医医院,内蒙古 阿拉善 450306)

蒙药地格达属的指纹图谱比较研究

道日娜

(内蒙古自治区阿拉善盟蒙医医院,内蒙古 阿拉善 450306)

目的：建立地格达属药材的HPLC指纹图谱，为其药材质量评价提供依据。方法：以龙胆苦苷为参照物，采用高效液相色谱法，对4种地格达进行了指纹图谱分析。采用CenturySILC18-EPS5μm250×4.6mm的色谱柱，流动相：甲醇：乙腈：水(0.1%磷酸)进行梯度洗脱，流速：0.8mL,检测波长：270nm，柱温：30℃，进样量：10μL。结果：该方法精密度高，重现性好，共分离了12个指纹峰。结论：不同地格达药材的内在质量存在差异，该方法可用于地格达属药材的质量控制。

蒙药地格达属药材;指纹图谱;高效液相;质量控制

蒙药材扁蕾(哈日-特木日-地格达)为龙胆科植物扁蕾Gentianopsis barbata (Froel.)Ma的干燥全草。扁蕾分布于我国东北、华北、西部地区。春、夏季采收,除去杂质阴干。味苦，性寒、钝、糙、轻、燥。具有平息“协日”,清热,愈伤之功效。蒙医多用于治疗 “协日”引起的头痛,“协日”热,中暑,黄疸,肝热,伤热等症。

蒙药花锚(希依日一地格达)为龙胆科植物花锚Halenia corniculata(L.)Cornaz.的干燥全草。花锚分布于我国东北、华北及陕西等地。夏、秋季采收，晾干。味苦，性寒。具有平息协日、清热、愈伤的功能。用于目黄，口苦，高烧，头痛，尿黄，协日热，伤热，脉热等症[3]。

蒙药肋柱花(哈毕日干·地格达)为龙胆科植物肋柱花Lo-matogonium rotatum( L. ) Fries ex Nym的全草。肋柱花分布于我国东北、华北、西北至西南等地。夏、秋季采收，晒干。味苦,性寒。具有平息“协日”,清热,健胃,愈伤等功能。用于瘟疫,流感,伤寒,中暑头痛,肝胆热,黄疸,胃“协日”,伤热等[4]。

蒙药湿生扁蕾(那木格音-哈日-特木日-地格达)为龙胆科植物湿生扁蕾Gentianopsis paludosa(Hook.f.)Ma的全草。湿生扁蕾分布于我国华北、西北及四川、云南、西藏等地。夏季采收，洗净，晾干。味苦，性寒。具有平息“协日”,清热清瘟热，利胆，止泻等功效。用于黄疸型肝，肝胆病引起的发热，感冒，小儿腹泻等。

4个品种的地格达类蒙药材在临床上广泛代替应用,其质量的好坏直接关系着人们的健康,但是目前市场上对地格达属的质量控制还缺少科学的依据,难以鉴别真伪。由于蒙药的药效不是来自任何单一活性成分，而是多种活性成分的协同综合作用。因此，仅采用单一化学成分的定性定量来评价蒙药质量已不能满足对蒙药质量控制的要求。由于指纹图谱能够从宏观和整体上表征蒙药材的特征，目前已成为国际上公认的控制天然药物质量的有效手段。为了临床疗效的稳定及其药品质量,采用了高效液相色谱法对蒙药地格达属药材的指纹图谱进行了研究，为地格达属药材的鉴别和质量控制提供实验依据。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪(出厂编号：C20974335270CS型号规格：LC-10AT/SPD-10A中国、生产厂家：岛津—苏州)，SHZ-Ⅲ型循环水真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)，电子天平(上海天平仪器厂)，KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

甲醇、乙腈、磷酸(分析纯和色谱纯)，纯净水，龙胆苦苷对照品。样品共收集了10个批次样品。

表1 地格达属药材收集情况

2 方法与结果

2．1 色谱条件色谱条件： 采用CenturySILC18-EPS5um250×4.6mm的色谱柱，流动相为甲醇：乙腈：水(0.1%磷酸)进行梯度洗脱，流速为0.8mL,检测波长为270nm，柱温为30℃，进样量为10μL。

表2 流动相梯度洗脱程序

2.2 对照品溶液的制备：精密称取对照品龙胆苦苷2mg置10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，配制成对照品储备液，使用时稀释成所需浓度。

2.3 供试品溶液的制备：精密称取扁蕾，花锚，湿生扁蕾，肋柱花各2g，用40mL甲醇回流提取4h，提取水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10mL，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

3 方法学与考察

3.1 精密度试验：取扁蕾供试品溶液，连续进样6次，检测指纹图谱。结果表明各色谱峰的相对保留时间的RSD为0.33%～1.03%，符合指纹图谱的要求。

3.2 重现性试验：取扁蕾按供试品溶液的制备方法分别制备6分供试品溶液，检测指纹图谱。结果各色谱峰的相对保留时间的RSD为0.36%～2.1%，符合指纹图谱的要求。

3.3 稳定性试验：取扁蕾供试品溶液，分别于0，3，6，9，12，15h进行检测，结果表明各色谱峰的RSD为0.37%～0.83%，供试品溶液在24h内稳定，符合指纹图谱的要求。

4 指纹图谱的建立及分析

4.1 指纹图谱的建立：确定12个特征峰构成扁蕾的指纹图谱。其中保留时间为27.890min的色谱峰为龙胆苦苷的峰。见图。

4.2 不同地格达药材的色谱指纹图谱测定：共收集了不同批次和地格达的药材10批，其中扁蕾1批，湿生扁蕾3批，花锚3批，肋柱花3批。按照上述确定的供试品制备方法及色谱条件，测定了所有10批样品的色谱图。结果(见图)

4.3 直观比较： 对10批不同采集时间和列别的地格达药材的HPLD色谱图的分析，发现不同列别的地格达药材之间的HPLC色谱图相差很大，而且与采集时间也不存在必然的联系。

4.4 相似度评价： 计算10批药材中各色谱峰的相对保留时间,共确定了12个共有指纹峰,各指纹峰的相对保留时间RSD值均小于2.1%,其中5号峰为龙胆苦苷峰.通过对已检测的10批药材指纹图谱分析,选择共有峰面积较大的图谱作为对照图谱,并用相关系数的计算与夹角余弦计算法计算10批药材的指纹图谱的相似度

表3 相似度评价结果

5 结论

从本实验看出10批地格达药材HPLC指纹图谱存在一定差异,从相似度评价结果表明，不同地格达的相似度计算结果均在0.89以上，采集时间的差异不明显。但从测定的10批地格达药材共有峰的峰面积比值来看，不同地格达所含成分的含量差异较大，在地格达药材质量控制方面需进一步深入研究，使之更能有效地反映药材的品质，为蒙药采的质量控制提供有效的信息。

2016年8月17日收稿

Study on chromatography fingerprint comparison of Mongolian medicine of Digeda

Dorina

Purpose：Establishing the chromatography fingerprint of medicinal materials of Digeda to provide a basis for evaluation of its quality. Method: With Gentiopicroside as reference, using high performance liquid chromatography, to ground up to be the fingerprint analysis.Chromatographic conditions as follows: CenturySILC18-EPS5um250x4.6mm chromatography columns,: CH3OH:C2H3N:H2O as elution solvents;go on gradient,a flow rate of 0.8ml/min, an ultraviolet detector at 270nm, temperature of 30℃ , Enter sample quantity of 10ul.Results：The method of high precision, reproducibility, and separation of a total of 12 fingerprint peaks. Conclusion： Inherent quality differences of different herbs, the method can be used to reach an herbal medicine quality control. Key words: Mongolian medicine of herbal medicine; chromatographic fingerprint; high performance liquid chromatography; quality control.

R291.2

B

1006-6810(2016)12-0056-03