南阳地区无偿献血人群梅毒抗体筛查试验方法学评价及结果分析

刘桂晔河南省南阳市中心血站检验科，河南南阳　473000



南阳地区无偿献血人群梅毒抗体筛查试验方法学评价及结果分析

刘桂晔
河南省南阳市中心血站检验科，河南南阳473000

［摘要］目的调查2012—2014年南阳地区无偿献血者TP抗体筛查阳性情况及人群分布特征，探讨双试剂TP抗体筛查试验方法的质量评价。方法2012—2014年南阳地区无偿献血者血清标本采用两种ELISA试剂进行筛查，对结果进行分析，并调查TP抗体阳性人群分布特点；留取经TPPA确证的95例阳性标本，81例阴性对照标本，同时进行双试剂TP抗体筛查试验，通过筛查试验与金标准的一致性检验对双试剂TP抗体筛查试验方法进行评价。结果2012—2014年南阳市无偿献血TP抗体阳性率为0.29%。TP抗体阳性率逐年升高，2014年与2012年TP抗体阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。2012—2014年献血人群TP抗体阳性分布：男女性差异有统计学意义（P＜0.05），各年龄段TP抗体阳性率差异无统计学意义（P＞0.05），个体人群TP抗体阳性率显著高于学生团体和军人团体，差异有统计学意义（P＜0.05），非稳定工作人群TP抗体阳性率显著高于稳定工作者，差异有统计学意义（P＜0.05）。双试剂TP抗体筛查试验灵敏度为94.7%，特异度为93.8%，总符合率为94.3%。双试剂TP抗体筛查试验与确证试验（TPPA）一致性检验中，一致性非常好，差异有统计学意义（Kappa=0.886，P＜0.001）。结论根据南阳市献血人群分布特点，选择低危人群，引导他们成为血液制品的主要来源，同时，提高实验室筛查试验效能保证输血安全。

［关键词］梅毒抗体；酶联免疫法；方法学评价；梅毒螺旋体凝胶凝集试验；一致性检验

梅毒是我国法定报告的乙类传染病，由梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）感染引起，可通过性接触、垂直传播、血液传播等多种途径传播，我国献血法规定，TP是各地采供血机构必检的病原体之一。目前检测TP的方法有多种，最准确的就是梅毒螺旋体凝胶凝集试验（TPPA），但是这种方法操作复杂，实验条件要求严格，且成本高，基层实验室应用较少。实验室开展较多的检测方法主要是快速血浆反应素试验（RPR）和酶联免疫法检测TP抗体，RPR检测特异性较差，影响因素较多，目前各地采供血机构检测TP抗体主要采用两种不同试剂酶联免疫法。该文主要研究2012—2014年南阳地区无偿献血者TP抗体筛查阳性情况及人群分布特征，并对双试剂TP抗体筛查试验的方法进行评价，现报道如下。

1　对象与方法

1.1研究对象

研究对象为南阳市无偿献血者251 092人次，其中男性150 862人次，女性100 230人次，年龄18～55岁，现场采集3 mL全血，离心提取血清待检。为评价梅毒抗体筛查试验方法的效能，留取经梅毒螺旋体凝胶凝集试验（TPPA）确证的阳性标本95例，阴性标本81例，-80℃冷冻保存，统一对其进行梅毒抗体筛查试验。

1.2试剂

TP抗体检测试剂：初检及复检均采用国产酶联免疫吸附试验试剂盒（试剂一，珠海丽珠；试剂二，北京万泰）。TPPA确证试剂盒。

1.3方法

1.3.1 TP抗体筛查试验双试剂，均采用酶联免疫法，检测过程和结果判定均严格按照试剂盒说明书及实验室SOP文件进行，分别测定样本吸光度值（S）及对照样本的临界值（CO）。

1.3.2 TP确证试验梅毒螺旋体凝胶凝集试验，检测过程和结果判定参照试剂盒说明书及实验室SOP文件进行。

1.4结果判断

TP抗体筛查试验两种ELISA法均以S/CO≥1为单一试验方法阳性，双试剂TP抗体筛查试验结果判断标准：当双试剂试验结果均为阳性时，判断为TP抗体阳性；当只有一种试剂结果为阳性，对该标本用该试剂进行双孔检测，如果双孔均为阳性或有一孔阳性即判为TP抗体阳性；当双试剂试验结果为阴性时，判为TP抗体阴性；TPPA以操作说明书判定的阳性为阳性。

1.5诊断方法学评价

TPPA确证阳性组试验结果阳性的为真阳性（TP），结果阴性的为假阴性（FN），TPPA确证阴性对照组中，诊断试验阳性的为假阳性（FP），诊断试验阴性的为真阴性（TN）。敏感度=（TP/（TP+FN））×100%，特异度=（TN/ （TN+FP））×100%，阳性预测值=（TP/（TP +FP））×100%，阴性预测值=（TN/（TN + FN））×100%，总符合率=（（TN+ TP）/（TN + FN+ TP +FP））×100%。

1.6统计方法

统计学分析采用SPSS 17.0软件，阳性率比较采用χ2检验，诊断试验方法学评价，采用筛查试验与确证试验的一致性检验。

2　结果

2.1 2012—2014年南阳市无偿献血者TP抗体筛查结果

2012—2014年南阳市无偿献血人数总数为251 092人次，TP抗体阳性率为0.29%。2012—2014年TP抗体阳性率逐年上升，分别为0.25%、0.29%、0.31%，见表1。

表1　2012—2014年南阳市无偿献血者TP抗体筛查阳性情况

2.2不同献血人群TP抗体阳性分布

2.2.1 2012—2014年献血人群TP抗体阳性性别分布2012—2014年献血人群中男性150862人次，女性100230人次，男女TP抗体阳性率分别为0.35%、0.20%，差异有统计学意义（χ2=43.379，P＜0.05），见表2。

2.2.2 2012—2014年献血人群TP抗体阳性年龄分布2012—2014年献血人群TP抗体阳性年龄分布如表2所示，TP抗体阳性以26～35岁和36～45岁年龄段居多，但各年龄段TP抗体阳性率差异无统计学意义（χ2=7.255，P＞0.05）。

2.2.3 2012—2014年献血人群不同献血组织方式TP抗体阳性分布2012—2014年献血人群中学生团体献血25 081人次，军人团体21 088人次，个体人群204 923人次，TP抗体阳性率分别为0.19%、0.16%、0.31%，个体人群TP抗体阳性率显著高于学生团体和军人团体，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

2.2.4 2012—2014年献血人群不同工作状况TP抗体阳性分布2012—2014年献血人群中稳定工作者献血163 895人次，非稳定工作者87 197人次，TP抗体阳性率分别为0.25%、0.36%，非稳定工作人群TP抗体阳性率显著高于稳定工作者，差异有统计学意义（χ2=25.793，P＜0.05），见表2。

2.3双试剂TP抗体筛查试验方法学评价

2.3.1双试剂TP抗体筛查试验基本指标评价在疾控中心留取金标准（TPPA）诊断为阳性的95例样本中，双试剂TP抗体筛查试验为阳性者有90例，5例两种方法检测均为阴性；在TPPA诊断为阴性的81例样本中，双试剂TP抗体筛查试验为阳性者有5例，76例两种检测方法均为阴性，见表3。双试剂TP抗体筛查试验灵敏度为94.7%，特异度为93.8%，阳性预测值为94.7%，阴性预测值为93.8%，总符合率为94.3%。

表2　2012—2014年不同献血人群TP抗体阳性分布

2.3.2双试剂TP抗体筛查试验与确证试验一致性检验

评价双试剂TP抗体筛查试验的诊断价值，采用待评价的诊断试验方法与金标准的一致性检验。双试剂TP抗体筛查试验与确证试验（TPPA）一致性检验中，说明双试剂TP抗体筛查试验与确证试验一致性非常好，差异有统计学意（Kappa=0.886，P＜0.001）。见表3。

表3　TP抗体筛查试验评价

3　讨论

我国献血法规定，梅毒螺旋体感染是各地采供血机构必检的病原体，根据吴晓雪［2］对温州市无偿献血者血液报废原因的分析，梅毒抗体阳性引起的血液报废占总采血量的0.58%，居血液感染性报废原因首位。

2012—2014年南阳市无偿献血人数总数为251 092人次，TP抗体阳性率为0.29%。TP抗体阳性率低于北京市［3］、广州市［4］、张掖市［5］等地，其原因可能与南阳市属于农业大市、流动人口较少有关。另外，近年来，南阳市血液中心积极开展无偿献血知识讲座和安全宣传教育，招募低危献血员成为固定献血者，屏蔽梅毒抗体阳性献血者，都在降低献血人群梅毒抗体阳性率方面起着积极作用。

2012—2014年献血人群TP抗体阳性分布：男女性差异有统计学意义，男性阳性率高于女性，该研究中，虽然TP抗体阳性以26～35岁和36～45岁年龄段居多，但各年龄段TP抗体阳性率差异无统计学意义。不同献血组织方式，TP抗体阳性率也不同，个体人群TP抗体阳性率显著高于学生团体和军人团体，这与学生和军人有较好的生活和饮食习惯、受过高等教育或严格的约束有关。非稳定工作人群TP抗体阳性率显著高于稳定工作者，这与工作环境、接触人群密切相关。军人、学生、稳定工作人员是低危献血人群，这与余加宏等［6］的结论一致。

目前检测TP的方法有多种，实验室开展较多的检测方法主要是RPR和酶联免疫法检测TP抗体，RPR检测由于特异性较差，目前仅应用于健康体检筛查，目前各地采供血机构检测TP抗体主要采用两种不同试剂酶联免疫法。该研究双试剂TP抗体筛查试验灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、总符合率均较高，双试剂TP抗体筛查试验与确证试验一致性非常好，有统计学意义，这与王宋兴等［7］对两种梅毒抗体检测试剂的质量评价结论相仿。也有研究者［8］指出，梅毒检测方法应根据梅毒感染阶段不同而变化，理论上可行，实施较为困难。

综上所述，献血前梅毒感染筛查是献血前检查的重要组成部分，采供血机构要充分做好感染筛查工作，同时对献血人群进行分析，引导低危献血人群成为无偿献血人群的主体。

［参考文献］

［1］Gabriela BG，Mary LK，Lori MN，et al. Untreated maternal syphilis and adverse outcomes of pregnancy：a systematic review and meta-analysis［J］.Bulletin of the World Health Organization，2013，91（3）：217-26.

［2］吴晓雪.2007-2011年温州市无偿献血者血液报废回顾性分析［D］.合肥：安徽医科大学公共卫生学院，2013.

［3］张莉，袁矅，孙莉，等.北京市无偿献血人群梅毒抗体筛查结果调查［J］.中国医药导报，2014，11（23）：94-97.

［4］黄伯泉，郑优荣，杜荣松，等. 2011-2013年广州地区无偿献血者梅毒筛查与确认结果分析［J］.广东医学，2015，36（4）：602-604.

［5］韩银.张掖市2005-2011年无偿献血人群梅毒感染情况分析［J］.甘肃医药，2014，33（1）：44-45.

［6］余加宏，沈军，卜坤，等.114736人次蚌埠地区无偿献血者血液检测结果调查分析［J］.安徽医学，2014，35（8）：1148-1151.

［7］王宋兴，曾劲峰，古醒辉，等.两种TP抗体检测试剂的质量评价［J］.国际检验医学杂志，2014，35（7）：930-931.

［8］丁国良，商发奎，延义芹，等.采供血机构对梅毒螺旋体检测的最佳方案探讨［J］.国际输血与血液学杂志，2014，37（3）：222-225.

Test Method for Screening Blood Donors in Nanyang Population Analysis and Evaluation Results of Syphilis Antibody

LIU Gui-ye
Blood Screening Test Department，the Blood Center of Nanyang City，Nanyang，Henan Province 473000 China

[Abstract]Objective To investigate from 2012 to 2014 in Nanyang blood donors TP antibody positive and population distribution，quality evaluation and test method for TP double antibody screening reagent. Methods The serum samples of two kinds of ELISA reagents for blood donation screening methods from 2012 to 2014 in Nanyang，the results were analyzed，and the investigation of TP antibody positive population distribution characteristics；95 positive specimens left from TPPA confirmed，81 negative control samples，and double reagent TP antibody screening test，the consistency test screening test and evaluation of the gold standard test method for TP double antibody screening reagent. Results The Nanyang 2012—2014 blood donation TP antibody positive rate was 0.29%. The positive rate of TP increased year by year，the difference was statistically significant in 2014 and 2012 TP antibody positive rate（P＜0.05）. 2012—2014 blood distribution of positive TP antibody group：men and women have statistically significant difference（P＜0.05），there was no significant difference in the age，the positive rate of TP antibody（P＞0.05），the positive rate of TP antibody was significantly higher than that of individual student groups and military groups，the difference was statistically significant（P＜0.05），the rate of positive TP antibody was significantly higher than that of non steady working population stability of workers，the difference was statistically significant（P＜0.05）. Double reagent TP antibody screening test sensitivity was 94.7%，specificity was 93.8%，the total coincidence rate was 94.3%. Double reagent TP antibody screening test and confirmatory test（TPPA）consistency test（Kappa = 0.886，P＜0.001），very good consistency，was statistically significant. Conclusion According to the distribution characteristics of blood donors in Nanyang City，choose a low risk population，and guide them to become the main source of blood products，at the same time，improve the efficiency of laboratory screening test to ensure the safety of blood transfusion.

[Key word]Syphilis antibody；ELISA；Method evaluation；Treponema pallidum gel agglutination test；Consistency test

收稿日期：（2015-09-27）

［基金项目］南阳市中心血站科技发展基金项目（2013GG098）。

DOI：10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.01.108

［中图分类号］R759.1

［文献标识码］A

［文章编号］1672-5654（2016）01（a）-0108-03