吡格列酮通过Wnt/β-catenin信号通路减轻大鼠血管平滑肌细胞钙化

高 敏 陈天雷 吴 琳 赵秀芬 邢昌赢 毛慧娟

吡格列酮通过Wnt/β-catenin信号通路减轻大鼠血管平滑肌细胞钙化

高 敏1，2陈天雷3吴 琳1赵秀芬1邢昌赢1毛慧娟1

目的：探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮(PIO)对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的作用及其相关机制。 方法：利用10 mmol/L β甘油磷酸(β-GP)诱导大鼠VSMC钙化，建立钙化模型(即钙化组)；同时以完全培养基培养大鼠VSMC为正常对照组，并分别以不同浓度(5 μmol/L、10 μmol/L、15 μmol/L、20 μmol/L)PIO干预，观察培养12d，用茜素红染色法检测细胞钙沉积并检测细胞外基质钙离子浓度来观察VSMC钙化程度。Western Blot检测大鼠VSMC的α平滑肌动蛋白(α-SMA)、Runx2、BMP2、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β)及核蛋白cyclin- D1的表达情况。选择合适的PIO浓度(20 μmol/L)并以PPARγ拮抗剂GW9662(20 μmol/L)干预，观察以上指标的变化。 结果：(1)钙化组钙离子浓度较正常对照组明显增高(P<0.05)，而不同浓度PIO均可减轻VSMC细胞外基质的钙离子浓度(P<0.05)，同时钙化组茜素红染色较正常对照组明显，而20 μmol/L PIO干预组茜素红染色较钙化组减轻最为明显；(2)钙化组大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2、cyclin-D1较正常对照组升高；20 μmol/L PIO可显著下调钙化大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2和cyclin-D1，并上调α-SMA的表达；(3)PPARγ拮抗剂GW9662可部分阻断PIO对钙化大鼠VSMC的干预作用。 结论：PPARγ激动剂PIO可减轻β-GP诱导的大鼠VSMC的钙化，其作用机制与下调Wnt/β-catenin信号通路活性有关。

过氧化物酶体增殖物活化受体γ 血管钙化 血管平滑肌细胞 Wnt/β-catenin信号通路

慢性肾脏病(CKD)患者的钙磷代谢失调驱动血管钙化，而血管钙化被公认为是终末期肾病(ESRD)患者心血管疾病(CVD)的主要因素[1]。因此，如何减缓血管钙化进程对于CKD，尤其ESRD患者有重要意义。血管钙化既往被认为是钙盐在细胞外基质的被动沉积过程，然而近年来越来越多的研究发现血管钙化是一个类似于骨形成的受多因素调控的主动调节过程，其中心环节是血管平滑肌细胞(VSMC)向成骨样细胞转化[2]。骨骼和血管系统在矿化作用中有着相似及相互的变化，称之为骨-血管轴[3]。而过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)在骨重塑中是一个重要的调节因子。……