高胆固醇对小鼠原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响

邓莉，宋丹

（湖北省丹江口市第一医院检验科，湖北丹江口442700）



高胆固醇对小鼠原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响

邓莉，宋丹

（湖北省丹江口市第一医院检验科，湖北丹江口442700）

摘要：目的观察高胆固醇对原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响。方法将小鼠原代成骨细胞按1×105接种于6孔板上，待细胞融合至80%左右，分别加入0μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml和50μg/ml的胆固醇溶液培养基继续培养24 h。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）的方法，检测成骨细胞核转录因子kappa B （NF-κB）和蛋白激酶B（Akt）的蛋白表达；采用实时荧光定量PCR方法，检测成骨细胞中人白细胞介素1α （IL-1α）、人白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的信使RNA（mRNA）表达；采用酶联免疫吸附法，检测细胞培养上清中IL-1α、IL-6和TNF-α的蛋白水平。结果胆固醇诱导成骨细胞中NF-κB的增加和Akt磷酸化水平降低，增加IL-1α、IL-6与TNF-α的mRNA和蛋白表达，且呈一定的剂量依赖性。结论高胆固醇可以通过Akt/NF-κB信号通路及其介导的炎症因子表达参与成骨细胞的调节。

关键词：成骨细胞；NF-κB；Akt；胆固醇

胆固醇水平与骨质疏松直接相关［1-3］，高胆固醇血症增加骨吸收、降低骨形成［4］。高胆固醇与原发性骨质疏松有一定关系，如对绝经期、老年性原发骨质疏松患者激素替代治疗可以减少骨质流失，提高骨密度，同时可见胆固醇降低［5-7］。高胆固醇对继发性性骨质疏松也有一定的作用，如糖皮质激素导致的股骨头坏死可见胆固醇升高［8］，胆固醇升高还可作为前列腺癌骨转移的临床指标［9］。胆固醇及其代谢产物可以抑制成骨细胞活性、降低骨盐沉积最终导致骨质疏松［10-11］。……