巨噬细胞表型改变在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎中的研究

陈绪勇 焦春雷 付康 冯晨钊 朱天琦 柯昌庶 冯杰雄

巨噬细胞表型改变在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎中的研究

陈绪勇 焦春雷 付康 冯晨钊 朱天琦 柯昌庶 冯杰雄

目的 通过检测先天性巨结肠患儿结肠组织中巨噬细胞表型的改变，探讨巨噬细胞活化与巨结肠相关性肠炎发病之间的关系。方法 收集先天性巨结肠患儿(肠炎组4例，非肠炎组6例)结肠远段及近段标本，行HE染色、评估各段肠管炎症损伤程度，CD68和iNOS免疫荧光双染法评估M1型巨噬细胞活化状况，CD68和Arg-1免疫荧光双染法评估M2型巨噬细胞活化状况，RT-qPCR检测各组肠管iNOS及Arg-1的mRNA表达水平。结果 免疫荧光染色显示，肠炎组近段结肠iNOS/CD68阳性细胞的百分比(73.12±2.48)%明显高于肠炎组远段结肠(54.19±1.98)%、非肠炎组近段结肠(49.35±2.70)%及远段结肠(43.18±4.21)%；而肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(33.15±4.81)%明显低于远段结肠(49.32±3.98)%；非肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(45.23±1.95)%亦低于远段结肠(56.52±2.79)%，差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR结果显示，肠炎组近段结肠iNOS表达明显升高，而Arg-1表达则在肠炎组及非肠炎组的远段结肠升高(P<0.05)。结论 先天性巨结肠相关性小肠结肠炎的发生可能与巨噬细胞向M1型转化有关。

先天性巨结肠相关性小肠结肠炎； 巨噬细胞表型

先天性巨结肠(Hirschsprung’s disease，HD)是由于肠道神经嵴细胞自近段向远段发生迁移失败，导致结肠远段黏膜下层及肌间层缺乏神经节细胞，进而引起腹胀及肠梗阻等症状[1]。巨结肠相关性小肠结肠炎(Hirschsprung’s disease associated enterocolitis，HAEC)是HD最常见的并发症，HAEC在术前发生率为6%～26%，在根治术后发生率为5%～42%[2-3]。HAEC具体发病机制不明确，可能与结肠近段肠管扩张、肠壁黏膜屏障破坏、细菌移位及感染、黏蛋白改变、黏膜内神经内分泌细胞数量减少、基因表达改变等有关[4-5]。有文献报道，在HAEC患儿肠道组织中，免疫球蛋白如IgA、IgM表达升高，CD68阳性的单核巨噬细胞、CD45RO阳性的中性粒细胞及CD57阳性的NK细胞表达均升高[6]。……