肖春林(兵团第六师农业科学研究所,新疆 五家渠 831300)
植物染色体制片方法的改进
肖春林
(兵团第六师农业科学研究所,新疆五家渠831300)

摘要:以普通小麦(2n = 6x = 42)为材料,对其种子进行发根,取其根尖分生区进行酶解法染色体制片。对比常规压片和去壁低渗火焰干燥法制片技术,酶解法制片技术易获得更好的分裂相,分布更加均匀的染色体片,更有利于后期的原位杂交进行信号标记实验。
关键词:小麦;根尖分生区;染色体制片
植物染色体制片技术是植物细胞遗传学、染色体工程、植物细胞生物学、植物细胞分类学和物种生物学等众多学科的基本实验技术[1]。对于染色体形态、结构、遗传行为及细胞变异等遗传学现象的分析,可以大大提高作物育种工作的效率和质量。因此,改善并提高染色体制片技术显得尤为重要。目前常用的染色体制片技术有2种,即普通压片技术和去壁低渗火焰干燥技术。前者虽然操作简单实用,但是需要制片者取材时间适宜,压片力量适中,对操作者的熟练程度要求较高;且处理一些细胞壁坚硬、难以软化的材料时,也不易获得良好的制片[2-3]。后者相比前者,需要的制片经验较少,且制片效果较好,但操作过程涉及酒精灯,需要火焰干燥和盖玻片压片,对染色体造成部分影响。酶解法在两者技术的基础上,对部分实验操作进行了改善,不仅可以得到分散良好的有丝分裂中期分裂相,而且还缩短了酶解的时间,提高了制片的效率,从而获得更好的染色体制片,为细胞学观察及相关的原位杂交(GISH)实验做准备。……