海马神经元初级纤毛染色技术探索

周晓春， 王珊珊， 安云鹤

(1. 唐山市丰润区中医院 中风二科， 唐山 063000; 2. 北京市理化分析测试中心, 北京 100089)

海马神经元初级纤毛染色技术探索

周晓春1， 王珊珊1， 安云鹤2

(1. 唐山市丰润区中医院 中风二科， 唐山 063000; 2. 北京市理化分析测试中心, 北京 100089)

摘要为了建立体外原代培养的大鼠海马神经元初级纤毛的染色标记方法，以体外原代培养的18 d 胎鼠的海马神经元为研究材料，应用荧光免疫细胞化学实验技术，分别在不同的时间点，应用不同的初级纤毛蛋白标记物的抗体[抗ADP核糖基化因子相似蛋白-13B(ARL13B)抗体，抗III型腺苷酸环化酶(ACIII)抗体]对海马神经元初级纤毛进行染色，然后应用倒置荧光显微镜观察记录染色结果。从免疫荧光图像中看出，anti-ARL13B抗体和anti-ACIII抗体都能较好地标记海马神经元初级纤毛，但anti-ARL13B抗体的染色效果更佳。随着体外原代培养天数的增加，初级纤毛长度逐步增加(anti-ACIII抗体标记组：纤毛生长从第1天的3.3 μm到第14天的8.5 μm逐渐增加；anti-ARL13B抗体标记组：纤毛生长从第1天的4.4 μm到第14天的9.1 μm逐渐增加)。对星型胶质细胞的ACIII和ARL13B进行免疫荧光染色，也能较好地标记其初级纤毛。ARL13B和ACIII都能作为大鼠海马神经元初级纤毛的标记物，但ARL13B体现出更好的特异性。初级纤毛会伴随着海马神经元的发育成熟而生长，提示初级纤毛在海马神经元的发育过程中可能发挥着重要作用。ARL13B和ACIII也可以作为星型胶质细胞初级纤毛的染色标志。

关键词初级纤毛；海马神经元；免疫荧光；ADP核糖基化因子相似蛋白-13B；III型腺苷酸环化酶