葡萄糖调节蛋白78和蛋白质二硫键异构酶在肝癌细胞内质网应激前后的表达*

李利波， 陈腾祥*, 潘　娅*

(贵州医科大学 生理学教研室， 贵州 贵阳　550004)

葡萄糖调节蛋白78和蛋白质二硫键异构酶在肝癌细胞内质网应激前后的表达*

李利波**， 陈腾祥***, 潘娅***

(贵州医科大学 生理学教研室， 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 探讨正常肝细胞和肝癌细胞在诱导发生内质网应激(ERS)前后细胞裂解液中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白质二硫键(PDI)、的表达水平。方法： 取培养获得的第3代正常肝细胞LO-2和肝癌HepG2与SMMC-7721细胞，采用150 mmol/L无水乙醇处理48 h诱导发生ERS；分别提取3种细胞裂解液中蛋白质，采用Western blot方法检测GRP78和PDI表达水平。结果： 在ERS前,GRP78在HepG2细胞中表达最高，其次为SMMC-7721细胞，在LO2细胞中表达最低，3种细胞GRP78表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.001)；诱导细胞发生ERS后，HepG2细胞及LO2细胞GRP78表达均上调，而SMMC-7721细胞GRP78表达下调，分别与相应细胞发生ERS前比较，差异有统计学意义(P<0.05)；在ERS前,PDI的表达在SMMC-7721细胞中最高，其次LO2细胞，在HepG2细胞中表达最低,3种细胞比较，差异有统计学意义(P<0.001)；诱导发生ERS后，与ERS前相对应细胞比较，3种细胞的PDI表达水平均下调，差异有统计学意义(P<0.05)。结论： ERS后，肝癌SMMC-7721和HepG2细胞裂解液中的GRP78表达水平发生变化，PDI表达降低。

[关键词]癌，肝细胞； 内质网应激； 蛋白质二硫键异构酶； 葡萄糖调节蛋白78

内质网是真核细胞中适应性最强的细胞器，内质网应激(ERS)是指在多种病理或生理因素的干扰下，内质网稳态被打破，发生错误折叠和未折叠蛋白质在内质网腔内聚集，并引起Ca2+平衡紊乱[1]。ERS主要包括未折叠蛋白反应(UPR)、内质网超负荷反应(EOR)和固醇调节级联反应(SREBP)，研究认为癌症相关的病理与内质网稳态的失衡与诱导ERS和UPR途径有关[2-5]。蛋白质二硫键异构酶(PDI)是内质网中一种重要的蛋白质折叠催化剂，可帮助新合成的蛋白质重新形成二硫键并产生正确折叠的构象。葡萄糖调节蛋白78(GRP78)是内质网中的一种结合蛋白，可增强肿瘤细胞的增殖和侵袭能力，被视为肿瘤治疗反应的一种生物标志物[6]。原发性肝癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一，在我国的发病率和死亡率占全球的50%[7]。……