HDAC1 siRNA对TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT的影响

王卫卫，王佳佳，徐春红，郭白银，戴保秀，徐国萍

（大理大学基础医学院，云南大理　671000）



HDAC1 siRNA对TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT的影响

王卫卫，王佳佳，徐春红，郭白银，戴保秀，徐国萍*

（大理大学基础医学院，云南大理671000）

［摘要］目的：探讨HDAC1 siRNA对TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞EMT过程中细胞表型、功能的影响。方法：加入HDAC1 siRNA转染RLE-6TN后，再加TGF-β1后收取细胞。采用倒置显微镜观察各组细胞形态改变，免疫荧光检测表型改变，W.B及实时定量PCR检测其HDAC1、8，E-cad及α-SMA的表达；Transwell小室检测细胞体外迁移能力。结果：形态学上，TGF-β1能诱导RLE-6TN发生EMT，转染后细胞多边形、铺路石状；荧光显微镜下，TGF-β1组出现α-SMA表达，HDAC1表达增加，转染组相反；在mRNA水平，TGF-β1组E-cad表达下调、HDAC1、8上调，转染组HDAC1、8表达下调，α-SMA上调。在蛋白水平，TGF-β1组E-cad表达下调、α-SMA及HDAC1上调，转染组相反。体外迁移能力方面，TGF-β1组迁移细胞增多、转染组减少。结论：HDAC1 siRNA能部分逆转TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮EMT。

［关键词］HDAC1 siRNA；TGF-β1；肺泡Ⅱ型上皮细胞；上皮间质转化

［DOI］10. 3969 / j. issn. 2096-2266. 2016. 04. 009

肺纤维化（Pulmonary fibrosis，PF）是多种肺间质性疾病的共同结果，引起呼吸衰竭的重要原因。近年随着人口老龄化进程，肺间质纤维化发病率逐年上升。但其发病机制尚未完全阐明，治疗效果不佳。

肺纤维化主要的效应细胞是肌成纤维细胞（Myofibroblast，MFb）。早期研究发现，MFb可来自肺间充质细胞及骨髓〔1〕。近年及本课题组前期的研究证实，肺泡Ⅱ型上皮细胞通过上皮向间质细胞转变（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）也可成为MFb的另一个主要来源〔2-3〕。越来越多的研究明确了EMT在肺纤维化发病机制中的重要作用〔4〕。近年研究发现，组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）与多种组织和器官纤维化的发生发展密切相关，其抑制剂Trichostatin A（TSA）能通过降低细胞内HDAC的水平、抑制细胞EMT，而能防止心、肾、肝及皮肤纤维化〔5-8〕。……