水飞蓟中木脂素的发现及其生物活性研究

张艳 彭玉勃 陈效忠 宋丽艳

[摘要]以蒸馏水为溶剂回流提取水飞蓟种子，提取物依次过D101大孔树脂、MCI树脂、MPLC色谱、HPLC色谱等色谱分离纯化得到7个化合物。经NMR解析确定化合物1～7分别为tricin 4′O[threoβguaiacyl（7″Omethyl）glyceryl] ether（1）， tricin 4′O[erythroβguaiacyl（7″Omethyl）glyceryl] ether（2）， 5′methoxyhydnocarpinD（3）， palstatin（4），（8R，7′S，8′R）5，5′dimethoxy7oxolariciresinol 9′ODxylopyranoside（5）， 9ODglucopyranoside（6），（-）haplomyrtoside（7）。化合物1，3～5具有较强的抗流感病毒（H5N1）活性， IC50分别为065， 021， 032和056 μmol·L-1，SI（SI=TC50/IC50）分别为125， 35， 106， 78。化合物1，2，6，7具有较好的抗人肝癌细胞（HepG2）活性，IC50分别为035， 025， 053， 066 μmol·L-1。化合物1～7为从该植物中首次分离得到。

[关键词]水飞蓟；木脂素； 抗流感病毒活性； 细胞毒活性

[Abstract]The seeds of Silybum marianum were extracted by hot water， and the extract was isolated by D101 macroporous resin， MCI resin， MPLC， HPLC， et al As a result， 7 compounds including tricin 4′O[threoβguaiacyl（7″Omethyl）glyceryl] ether（1）， tricin 4′O[erythroβguaiacyl（7″Omethyl）glyceryl] ether（2）， 5′methoxyhydnocarpinD（3），palstatin（4），（8R，7′S，8′R）5，5′dimethoxy7oxolariciresinol 9′ODxylopyranoside（5）， 9ODglucopyranoside（6）， and（-）haplomyrtoside（7） were isolated and identified for the first time Compounds 1， 3， 4， and 5 exhibited activity against influenza A（H5N1）with IC50 value of 065， 021， 032， and 056 μmol·L-1， respectively Compounds 1， 2， 6， and 7 exhibited cytotoxity against HepG2 with IC50 value of 035， 025， 053， 066 μmol·L-1， respectively

[Key words]Silybum marianum； lignan； antiinfluenza virus activity； cytotoxity

doi：10.4268/cjcmm20160915

水飞蓟Silybum marianum （L）Gaertn是菊科水飞蓟属植物，性凉、味苦、归肝、胆经。具有清热解毒，舒肝利胆之功效。用于治疗肝胆湿热、胁痛、黄疽等证。水飞蓟特有成分为黄酮型木脂素类化合物，统称为水飞蓟素（silymarin），主要包括水飞蓟宾（silybin）、异水飞蓟宾（isosilybin）、水飞蓟宁（silydianin）、水飞蓟亭（silychristin）、脱氢水飞蓟宾（dehydrosisilybin）、聚水飞蓟宾（silybinomer）等[1]。除以上成分外，日本学者竹本常松等还获得2种新的黄酮型木脂素：2，3脱氢水飞蓟宾（2，3dehydrosilmarin）和2，3脱氢水飞蓟亭（2，3dehydrosilychristin）。本课题组前期研究中分离得到了水飞蓟中5个黄酮类化合物[2]，然而没有得到黄酮型木脂素类化合物。为了继续寻找具有生物活性的黄酮型木脂素类化合物，课题组继续对水飞蓟进行成分与活性的研究。

1材料

核磁共振谱：INOVA500核磁共振仪， 溶剂峰为内标； 分析型HPLC：Agilent 1100 Series 型高效液相色谱仪， DADUV 检测器， YMC C18（46 mm×150 mm，5 μm）色谱柱， 以及Diamonsil C18（46 mm×250 mm，5 μm）色谱柱； 制备型HPLC：Shimadazu LC6AD， SPD6A， SPD10A 紫外检测器， SPD紫外检测器， YMCPack ODSA（20 mm×250 mm，10 μm）色谱柱； 制备型MPLC：Biotage 公司FLASH，ODS（50 mm×60 mm， 10 μm）色谱柱。

水飞蓟药材于2014年10月采集于黑龙江省佳木斯地区，经黑龙江中医药大学佳木斯学院陈效忠副教授鉴定为水飞蓟S marianum种子。

2提取与分离

干燥的水飞蓟种子10 kg，粉碎后用蒸馏水回流提取3次，每次1 h。……