茶多酚对谷氨酸介导的大鼠海马神经元损伤的影响及可能机制

吴焕童，刘婷婷，曹畅,张淑萍Δ，覃筱燕Δ

(1.中央民族大学 北京市食品环境与健康工程技术研究中心，北京 100081；2.中央民族大学 生命与环境科学学院，北京 100081)

茶多酚对谷氨酸介导的大鼠海马神经元损伤的影响及可能机制

吴焕童1,2，刘婷婷1,2，曹畅1,2,张淑萍1,2Δ，覃筱燕1,2Δ

(1.中央民族大学 北京市食品环境与健康工程技术研究中心，北京 100081；2.中央民族大学 生命与环境科学学院，北京 100081)

目的 探讨茶多酚(tea polyphenols，TP)对谷氨酸(Glutamate，Glu)介导的神经元毒性损伤的影响及可能机制。方法 运用大鼠乳鼠海马神经元原代培养细胞，Glu诱导建立细胞损伤模型。实验分6组：对照组、Glu模型组、抑制剂+Glu模型组、TP+Glu组、TP+抑制剂+Glu组和TP组。神经细胞标记微管蛋白β-tubulin Ⅲ染色和DAPI细胞核染色鉴定神经元的纯度和细胞骨架结构形态；MTT法测定细胞活性；Western blot检测细胞中p-Akt和p-Erk 1/2蛋白的表达。结果 β-tubulin Ⅲ和DAPI染色结果显示，培养的海马神经元生长良好，纯度>90%；β-tubulin Ⅲ染色结果显示Glu模型组表现出典型的神经细胞骨架结构损伤的形态特征，TP可拮抗Glu诱导的神经元凋亡的形态学改变；MTT结果显示TP+Glu组细胞存活率明显高于Glu模型组(P<0.001)；与TP+Glu组(1.190±0.2072)相比，TP+ LY29004+Glu组神经元存活率明显减少(P<0.01)；与TP+Glu组(1.861±0.1804)比较，TP+ PD098059+Glu组神经元存活率显著减少(P<0.01)；Western blot结果显示, 与Glu模型组相比，TP+Glu组p-Akt和p-Erk 1/2蛋白表达量均明显升高(P<0.01;P<0.001)。结论 茶多酚对Glu介导的海马神经元损伤具有保护作用，其可能通过上调p-Akt和p-Erk 1/2的表达抑制Glu介导的海马神经元损伤。

茶多酚；谷氨酸；海马神经元；p-Akt；p-Erk 1/2

谷氨酸(Glutamate, Glu)的兴奋毒性引起神经元的凋亡与丢失和很多急慢性神经退行性疾病相关，包括帕金森病(Parkinson’s disease, PD)和阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)等[1]。Glu过度释放和堆积于细胞外是AD等神经退变病理发展过程的另一个重要问题[1-2]。因此，针对急慢性神经退行性疾病，寻找对抗Glu介导的神经毒性的方法和药物成为一个重要的治疗策略和研究热点[2]。

茶叶具有预防心脑血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、抗炎等多种生物学功能，其主要药理活性成分为茶多酚(tea polyphenols，TP)[3-5]。本……