吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53表达及预后的影响

程国平，吴超琦，范柳倩

(浙江省肿瘤医院 病理科，浙江 杭州 310022)

吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53表达及预后的影响

程国平Δ，吴超琦，范柳倩

(浙江省肿瘤医院 病理科，浙江 杭州 310022)

目的 探究吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53表达及预后影响。方法 选取2007年10月～2014年6月浙江省肿瘤医院病理科收治的肺癌患91例，46例口服吉非替尼治疗的归入治疗组，45例采用紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗的归入对照组。2组患者予以常规治疗以及个体化对症治疗后，均有支气管镜活检、粗针穿刺、胸水细胞包埋或手术样本，进行免疫组化染色后对比分析2组Ki-67及p53阳性表达率、pU值及复发率。结果 与对照组相比，治疗组患者的Ki-67及p53阳性表达率较低(P<0.05)，阴性表达率较高(P<0.05)，Ki-67及p53pU值较低(P<0.05)，复发率较低(P<0.05)。结论 吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53的基因表达具有调控作用，抑制癌细胞的侵润和转移，改善临床疗效与预后。

吉非替尼；肺癌；Ki-67；p53；预后

肺癌是临床常见的肺原发性恶性肿瘤[1]，起源于支气管粘膜上皮的癌细胞转移侵袭，又称为原发性支气管肺癌。近年来肺癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势，世界卫生组织预测,至2025年我国肺癌患者将达到100万[2]。吉非替尼是一种选择性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)[3]，具有抑制癌组织生长、转移以及血管生成，加速肿瘤凋亡的作用。研究显示，吉非替尼适用于既往接受过化疗、晚期以及化疗局部转移的非小细胞肺癌[4]。Ki-67及p53蛋白表达与肺癌的生物学行为以及癌症预后有紧密联系，因此本实验就吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53表达及预后影响进行研究分析，为阐明吉非替尼在肺癌临床治疗中的价值提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2007年10月～2014年6月浙江省肿瘤医院病理科收治肺癌患91例，男性49例，女性42例，年龄35～82岁，平均年龄(63.74±4.63)岁，其中腺癌45例，鳞癌34例，细支气管肺泡癌7例，其余5例。根据治疗方法分配为治疗组与对照组，其中治疗组46例，男性25例，女性21例，年龄38～82岁，平均年龄(64.62±4.82)岁；对照组45例，男性24例，女性21例，年龄35～80岁，平均年龄(62.81±4.91)岁，2组患者性别、年龄、等一般资料均相仿，差异无统计学意义。纳入标准：所有病例均符合以下条件：①诊断符合《2014第一版NCCN小细胞肺癌治疗指南》[5]中肺癌的诊断标准具备以下临床特点：咳嗽，多为刺激性咳嗽；痰中带血；胸闷胸痛，病情加重疼痛加剧；气促；发热；晚期出现晚期可出现疲乏、体重减轻、食欲下降以及呼吸困难等症状，严重恶病质；②局限性哮鸣音；声音嘶哑；肩臂疼痛；膈神经麻痹；吞咽困难；③MRI以及CT证实为肺癌；支气管镜检查证实肿瘤病灶以及位置；痰液细胞学检查发现癌细胞；④年龄大于18岁。排除标准：①药物过敏史，接受免疫抑制剂治疗的病例；②风湿免疫性疾病、严重高血压、糖尿病以及严重心、肝、肾等多脏器功能障碍或衰竭；③合并其他恶性肿瘤、癫痫等神经系统疾病。④治疗后无法获取病理样本。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：2组病例入院后均进行常规入院检查，实施维持点解质平衡、抗病毒、吸氧等常规治疗，根据患者病情、全身状况以及医疗设备制定个体化对症治疗；治疗组口服吉非替尼治疗，口服吉非替尼片(进口药品：英国 AstraZeneca KK，分装企业：阿斯利康制药有限公司，国药准字J20100014)250 mg，1次/天，每7 d为一个疗程。对照组采用紫杉醇联合顺铂化疗方案，75 g/m2紫杉醇注射液(北京协和药厂，国药准字H20083786)混合500 mL 5%葡萄糖静脉滴注，60 mg/m2顺铂注射液(南京制药厂有限公司，国药准字H20030675)混合500 mL 0.9%的氯化钠注射液内静脉滴注，7 d一个疗程，每疗程第一天重复注射治疗。

1.2.2 检测方法：所有病例均有肿瘤组织进行活检，采取免疫组化法进行肺癌细胞株中Ki-67及p53 mRNA的表达，按照常规方法进行脱水并对标本实施10%福尔马林液固定石蜡包埋处理。采用北京中杉生物技术提供的浓缩型兔抗人Ki-67及p53多克隆抗体和二步法免疫组化广谱检测试剂盒，进行免疫组织化学染色，对制成的免疫组化片结果进行判读，并分类记录。

患者治疗后进行3个月～1年的随访，以电话、门诊以及登门访问等形式进行，记录复发例数并计算复发率。

2 结果

2.1 肺癌细胞株中Ki-67及p53的表达 治疗后与对照组相比，治疗组Ki-67及p53阳性表达率较低(P<0.05)，阴性表达率较高(P<0.05)，见表1。治疗后与对照组相比，治疗组Ki-67及p53pU值较低(P<0.05)。见表2。其免疫组化图片分别见图1、图2。

表1 治疗后2组患者Ki-67及p53表达比较[n(%)]

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group

表2 治疗后2组患者pU值比较

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group

图1 Ki-67在肺癌病例中的表达Fig.1 Expression of Ki-67 in lung cancer cases

图2 p53蛋白病例中的表达Fig.2 Expression of p53 protein in lung cancer cases

2.3 预后评价 治疗后与对照组相比，治疗组复发率较低(χ2=5.080，P<0.05)。见表3。

表3 治疗后2组患者复发率比较 [n(%)]

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group

3 讨论

肺癌是当今危害人类健康的恶性肿瘤之一，在全世界范围内发病率和死亡率位居首位，其中约80%肺癌患者属于非小细胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer，NSCLC)。据研究统计，全世界发生的肺癌病例超过130万人，新发生癌症中12%为肺癌患者[6]。临床传统的化疗和放疗治疗方案特异性较低，毒副作用严重侵害患者的正常细胞组织，含铂化疗5年内生存率仅为15.7%。肺癌具有许多突变的基因亚型，临床上靶向治疗相关的基因成为研究重点，特异性较高的分子靶点有效延长肺癌患者生存时间，提高患者生活质量，降低对正常组织细胞的毒副作用。研究学者发现，吉非替尼是一种选择性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)[7]，该酶常见于表达上皮来源的实体瘤。抑制EGFR酪氨酸激酶活性作用从而阻碍肿瘤的生长，预防转移以及血管生成，加速肿瘤细胞凋亡进程。

Ki-67是一种核蛋白有NKI-67基因编码，临床在病理免疫组化中提示细胞增殖活跃程度，Ki-67蛋白参与mRNA的转录，其活性降低，使mRNA活性降低，合成受限，在细胞增殖各期均有表达。Ki-67能够客观反映肿瘤细胞的增殖情况，可以作为影响预后的因素[8]。研究显示，Ki-67的过度表达诱发细胞无限制增生而引发肿瘤，病理结果中指数高提示肿瘤分化程度高，侵润增加[9]，转移部位增多，预后差；反之，证实肿瘤分化程度低，侵润以及转移较少，预后良好。p53是一种临床发现较早的肿瘤抑制基因之一，参与细胞增殖和分化的调控，p53蛋白具有调节细胞周期以及预防细胞癌变的作用[10]。p53是一种最容易发生突变的抑癌基因，与肿瘤的形成密切相关[11-13]。p53蛋白从一定程度上维持基因组的稳定性，防治肿瘤细胞突变转移。 机体内许多细胞健康的信号的传递由p53蛋白参与进行。若机体出现细胞受损，p53蛋白参与修复，加速细胞在细胞凋亡中的死亡。研究显示，p53蛋白具有抑制癌细胞生长的作用，对癌症的发生发展以及预后相关性[14]，p53阳性表达化疗疗效明显低于阴性表达者。本研究表明，与对照组相比，治疗组患者的Ki-67及p53阳性表达率较低(P<0.05)，阴性表达率较高(P<0.05)，Ki-67及p53 pU值较低(P<0.05)，本实验通过免疫组化检测结果的对比分析Ki-67及p53定量反映免疫组化显色反应的阳性强度，结果表明证实吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53的基因表达具有调控作用，抑制癌细胞的侵润和转移，加速癌细胞死亡，改善临床疗效。随访中发现治疗后与对照组相比，治疗组复发率较低(P<0.05)。吉非替尼耐受性较好，患者生活质量也得到改善[15]。

本研究通过对本院肿瘤科收治肺癌患81例的病理染色、Ki-67及p53阳性表达率、pU值、随访复发率进行研究，证实了吉非替尼对肺癌患者Ki-67及p53的基因表达具有调控作用，抑制癌细胞的侵润和转移，改善临床疗效与预后，对患者延长生存更有价值适宜临床推广应用。下一步研究将对治疗后患者延长随访时间，从患者生活质量作进一步研究。

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(编校：王冬梅)

Effect of Ki-67 and p53 expression and prognosis in patients with lung cancer by Iressa

CHENG Guo-pingΔ, WU Chao-qi, FAN Liu-qian

(Department of Pathology, Cancer Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310022, China)

ObjectiveTo investigate the effect of Ki-67 and p53 expression and prognosis in patients with lung cancer by Iressa.Methods91 cases of lung cancer in Cancer Hospital of Zhejiang Province from October 2007 to June 2014 were randomly divided into 45 cases in control group and 46 cases in treatment group. Two groups of patients were treated with conventional therapy and individual symptomatic treatment; The treatment group was treated with oral administration of Iressa, two groups of patients were selected according to the condition of each patient lobe or lung resection, chemotherapy regimen of paclitaxel combined with cisplatin. After the end of treatment, two groups were compared, the positive expression rate of pU, Ki-67, p53 and the recurrence rate were compared.ResultsCompared with control group, the positive expression rate of Ki-67 and p53 in treatment group was lower (P<0.05), the negative expression rate was higher (P<0.05), Ki-67 and p53pU were lower (P<0.05), and the recurrence rate was lower (P<0.05).ConclusionIressa has regulation function in patients with lung cancer by the gene expression of and Ki-67 and p53, which can inhibit the invasion and metastasis of cancer cells, improve the clinical efficacy and prognosis.

Iressa; p53; lung cancer; Ki-67; prognosis

程国平，通信作者，男，本科，主管技师，研究方向：肿瘤病理，E-mail：cgpzjhz@126.com。

R734.2

A

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.03.25