新藤黄酸诱导黑色素瘤B16细胞线粒体自噬的机制研究

陆　莹，李庆林

(安徽中医药大学，安徽 合肥 230061)



新藤黄酸诱导黑色素瘤B16细胞线粒体自噬的机制研究

陆莹，李庆林

(安徽中医药大学，安徽 合肥 230061)

[摘要]目的探讨新藤黄酸诱导黑色素瘤B16细胞线粒体自噬的机制。方法MTT试验检测新藤黄酸对黑色素瘤B16细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜观察黑色素瘤B16细胞在新藤黄酸作用下产生的形态变化；透射电镜观察新藤黄酸对黑色素瘤B16细胞线粒体超微结构的影响；流式细胞术检测新藤黄酸诱导黑色素瘤B16细胞线粒体膜电位及ROS的改变；Western blot 法检测LC-3、mTOR、AMPK及SIRT3等自噬相关蛋白的变化。结果MTT结果显示新藤黄酸在体外对黑色素瘤B16细胞的生长及增殖有明显抑制作用，且随着新藤黄酸浓度的增加和作用时间的延长，细胞活力明显下降；倒置显微镜观察黑色素瘤B16细胞显示随着新藤黄酸浓度增加，细胞结构被明显破坏，细胞死亡增多；透射电镜观察发现新藤黄酸作用黑色素瘤B16细胞后，细胞发生明显的线粒体自噬的形态学变化；Western blot法检测表明随着新藤黄酸给药时间的延长， AMPK、SIRT3及LC3-Ⅱ蛋白表达量呈时间依赖性上升，LC3-I蛋白表达量呈时间依赖性下降，mTOR蛋白表达量随着时间延长有所下降。结论新藤黄酸在一定时间和浓度范围内能够抑制黑色素瘤B16细胞的增殖，诱导细胞发生线粒体自噬，其诱导细胞线粒体自噬的机制可能与调控ROS/SIRT3/AMPK信号通路有关。

[关键词]新藤黄酸;黑色素瘤；B16细胞；线粒体自噬;分子机制

皮肤黑色素瘤是一种源于……