黄芪多糖对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响

沈玉珏

(河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸 056001)



黄芪多糖对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响

沈玉珏

(河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸 056001)

[摘要]目的研究黄芪多糖对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响，并探讨其可能作用机制。方法分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后分为空白对照组、H2O2组、黄芪多糖20 μmol/L+H2O2组、黄芪多糖40 μmol/L+H2O2组、黄芪多糖80 μmol/L+H2O2组，每组设10个复孔。每组给予相应干预24 h后，采用MTT法检测细胞存活率，采用紫外-可见分光光度计检测细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)]活性，采用氧敏感荧光探针DCFH-DA检测氧自由基(ROS)含量，采用全自动生化分析仪检测培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]和丙二醛(MDA)含量，通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率，采用免疫印迹法检测细胞核因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况并进行半定量分析。结果与H2O2组比较，黄芪多糖40 μmol/L+H2O2组和黄芪多糖80 μmol/L+H2O2组细胞存活率及细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高(P均<0.05)，ROS含量显著降低(P<0.05)，培养液中AST、CPK、LDH和MDA含量及细胞凋亡率、NF-kB蛋白表达量均显著降低(P均<0.05)；黄芪多糖80 μmol/L+H2O2组细胞存活率及细胞中SOD、GSH-Px活性均显著高于黄芪多糖40 μmol/L+H2O2组(P均<0.05)，CPK、MDA含量及细胞凋亡率、细胞中NF-κB蛋白表达量均显著低于黄芪多糖40 μmol/L+H2O2组(P均<0.05)。结论黄芪多糖可能通过提高心肌细胞存活率、改善抗氧化酶活性、提高ROS清除能力、降低心肌酶含量、抑制细胞凋亡、下调NF-kB蛋白表达而对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤起保护作用，且高剂量效果更好。

[关键词]黄芪多糖；H2O2；心肌细胞；氧化应激

心肌细胞缺血再灌注损伤是影响急性心肌梗死患者溶栓、介入手术等手段治疗效果的重要因素之一，其病理机制非常复杂，其中氧化应激损伤是最重要的病理基础之一[1]，为研发抑制缺血再灌注损伤的新型药物提供了新的思路。黄芪多糖是我国传统中药黄芪的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗凋亡、抗肿瘤等多种药理学作用[2-5]。本研究观察了黄芪多糖对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响，并探讨了其可能作用机制，现将结果报道如下。……