不同温度下大鼠脑组织RNA降解与早期PMI的相关性

吕叶辉，李志宏，托　娅，刘　丽，李　堃，卞　杰，马剑龙，陈　龙（．上海健康医学院基础医学院，上海 038；．复旦大学基础医学院法医学系，上海 0003）



不同温度下大鼠脑组织RNA降解与早期PMI的相关性

吕叶辉1，李志宏1，托娅1，刘丽1，李堃1，卞杰1，马剑龙2，陈龙2
（1．上海健康医学院基础医学院，上海 201318；2．复旦大学基础医学院法医学系，上海 200032）

摘要：目的 探讨大鼠脑组织8种RNA指标，在不同温度下的表达水平与早期死亡时间（PMI）的相关性。方法 将222只SD大鼠随机分为对照组（死后0h）和4个实验组，实验组断颈处死后分别置于5℃、15℃、25℃和35℃的环境中，于死后1～24 h内9个时间点提取脑组织RNA，利用实时荧光定量PCR技术检测8种RNA指标（β-actin、GAPDH、RPS29、18S rRNA、5S rRNA、U6 snRNA、miRNA-9及miRNA-125b）的表达水平，geNorm软件选取合适内参，SPSS软件对内参标准化RNA指标进行回归分析，R软件构建推断PMI的数学模型，另选6只已知PMI的SD大鼠予以验证。结果 5S rRNA、miR-9和miR-125b表达稳定，可作为内参指标。β-actin和GAPDH具有良好的时序性降解规律，在24h内随PMI延长不断降解。R软件拟合得ΔCt值随PMI和温度变化的数学模型可用以推断PMI。运用β-actin和GAPDH验证模型的平均误差率分别为14.1%和22.2%。结论 β-actin和GAPDH表达水平与PMI和环境温度相关性良好。本研究建立的数学模型可为温度变化条件下的早期PMI推断提供参考。

关键词：法医病理学；RNA；死亡时间；温度；降解；大鼠

死亡时间（PMI）是指发现、检查尸体时距死亡发生时的时间间隔，PMI的精确推断有助于迅速确定涉案罪犯以及排除嫌疑人，为侦查部门提供重要线索，并为司法实践提供重要科学依据。利用传统的方法进行PMI推断，其结果易受主观因素和外界环境因素的影响，导致推断的精确性较低。……