烟草合子时期特异表达基因的克隆与分析

罗岸

摘要：在烟草合子中克隆到1种新型的未知功能基因NtZE583，编码包含有91个氨基酸残基的多肽链。生物信息学分析显示：该蛋白的N端含有1段疏水性信号肽，但在其他物种中没有发现同类蛋白。NtZE583-绿色荧光蛋白（NtZE583-GFP）融合蛋白亚细胞定位显示，该蛋白可能存在于液泡中。利用染色体步移技术获得该基因5′端上游3 866 bp的侧翼序列（启动子和5′UTR），经检测发现，具有较强的启动子活性。研究结果为进一步研究该基因在烟草早期胚胎发生中的功能奠定了基础。

关键词：烟草；合子；液泡；基因克隆；信号肽

中图分类号： S572.01；Q785文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）05-0065-04

被子植物的受精过程被称为双受精，即来自同一花粉的2个精子同时进入胚囊，1个与卵细胞结合形成二倍体的合子，另2个与中央细胞结合形成三倍体的胚乳母细胞。受精完成后，胚胎逐渐形成基本的形态和生理结构[1]，而胚乳则在此过程中扮演支持者的角色[2-3]。

对于受精和早期胚胎发生过程的分子机制在动物中研究得比较深入，但是在植物中由于技术手段的限制导致对这方面的认识一直有许多空白。因为植物的受精和胚胎发生过程都存在于深埋在植物孢子体内的胚囊中，所以很难对整个过程直接进行观察并了解背后的分子机制。随着现代生物学技术的发展，目前已能获得玉米、拟南芥、大米、大麦等一些植物的配子、合子和早期胚胎；此外，这些植物中与生殖发育息息相关的细胞cDNA文库、转录谱等也已陆续获得[4-7]。……