HPLC—DAD法同时测定清肺宁嗽丸中4种成分的含量

李宪刚　于远洋　董斌　张敬武

[摘要] 目的 建立用HPLC-DAD同时测定清肺宁嗽丸中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷4种成分含量的方法。 方法 采用安捷伦TC-C18（4.6mm×250mm，5μm）为色谱柱，以乙腈为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱（0～8min，19%A；8～30min，19%A→50%A），流速1.0mL/min；检测波长为280nm。 结果 甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷线性范围分别0.03208～0.3208μg（r=0.9992），0.03206～0.3206μg（r=0.9992），0.01720～0.1720μg（r=0.9994），0.2991～2.991μg（r=0.9999）；平均加样回收率（n=6）均在97.2%～101.3%范围内；RSD均小于2.0%。 结论 本研究建立的方法符合方法学验证要求，适用于同时测定清肺宁嗽丸中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、黄芩苷的含量。

[关键词] 清肺宁嗽丸；HPLC-DAD；甘草苷；柚皮苷；橙皮苷；黄芩苷

[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2016）09-36-04

[Abstract] Objective To establish a method for simultaneous determination of liquriritin， naringin， hesperidin and baicalin four ingredients in Qingfei Ningsou Pills by HPLC-DAD. Methods The determination was performed by HPLC on Agilent TC-C18（4.6mm×250mm，5μm） column， The mobile phase consisted of acetonitrile （A）- 0.1% phosphoric acid solution （B） with gradient elution （0-8 min，19%A；8～30 min，19%A→50%A）at a flow rate of 1.0 mL·min-1； The detection wavelength was 280 nm. Results The calibration curves were linear in the range of 0.03208-0.3208μg（r=0.9992） for liquriritin，0.03206-0.3206μg （r=0.9992）for naringin，0.01720-0.1720μg（r=0.9994） for hesperidin，0.2991-2.991μg （r=0.9999）for baicalin. All recoveries （n=6） were within the range of 97.2%-101.3%， RSD values was less than 2.0%. Conclusion The established method of the article is consistent with the method validation requirements and can be used for simultaneous determination of liquriritin， naringin， hesperidin and baicalin in Qingfei Ningsou Pills.

[Key words] Qingfei Ningsou pills； HPLC-DAD； Liquriritin； Naringin； Hesperidin； Baicalin

清肺宁嗽丸由同药集团大同制药有限公司研制，具有清肺、止咳、化痰功能，用于肺热咳嗽，痰多粘稠。该中药复方制剂由黄芩、枳壳、甘草、橘红等十三味中药材粉碎，过筛，混匀而制成。质量标准收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第五册[1]，标准编号：WS3-B-1028-91，现行质量标准中尚无含量测定检验项目。由于其成分复杂，为实现对其进行有效的质量控制，建立准确、简单的分析方法至关重要。本研究查阅相关文献，建立HPLC-DAD梯度洗脱法在同一色谱条件下对中4种活性成分（甘草苷[2-3]、柚皮苷、橙皮苷[4-6]、黄芩苷[7-8]）同时测定的检测方法，采用该方法可有效地对清肺宁嗽丸的质量进行评估，为更全面有效地控制产品质量提供依据。

1 仪器与材料

Waters e2695高效液相色谱仪，配备waters2998二极管阵列检测器（DAD）、电子天平Sartorius BP211D②。甲醇、乙腈为色谱纯，硅藻土为化学纯（上海市奉贤奉城试剂厂），水为超纯水。……