出芽短梗霉PA—2产除草活性物质的初步分离

摘要：将出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）PA-2进行液体发酵，发酵液用等体积正丁醇萃取3次，正丁醇萃取液旋转蒸发去溶剂后进行硅胶柱层析，以二氯甲烷和甲醇的混合液进行梯度洗脱，每50 mL收集为1个馏分，共收集到50个馏分。生物测定结果表明，以二氯甲烷和甲醇（体积比20 ∶ 1）洗脱得到的馏分15～23对供试杂草野燕麦表现出了较强的活性，对野燕麦的除草抑制作用均为4级。合并馏分15～23，以二氯甲烷和甲醇（体积比15 ∶ 1）的混合液为展开剂进行薄层层析，生物测定结果表明，Rf值范围在0.19～0.83的活性条带对野燕麦有不同程度的抑制活性。HPLC分析PA1条带发现，该活性条带主要含有2个组分，最大吸收峰在220 nm，其保留时间分别为59.015、65.948 min。

关键词：出芽短梗霉；代谢产物；除草活性；分离纯化；柱层析；薄层层析

中图分类号：S482.4+9文献标志码：A文章编号：1002-1302（2016）06-0199-03

收稿日期：2015-04-27

基金项目：国家自然科学基金（编号：31160371、30860165）；国家科技支撑计划（编号：2012BAD19B02）。

作者简介：程亮（1978—），男，河南林州人，硕士，副研究员，主要从事杂草生物防治方面的研究。Tel：（0971） 5313283；E-mail：liangcheng1979@163.com。化学除草剂从应用至今已有70多年的历史，在提高农作物产量方面起到不可低估的作用。但从20世纪70年代中期以来，抗药性杂草种类一直呈上升趋势[1-2]。同时，随着环境保护呼声的日益提高，高毒性农药的大量使用对农业生产及生态环境造成的负面影响已引起世界范围的广泛关注。为了保护人类生存的环境和农业的可持续发展，除草剂的研制与使用将严格受到环境和生态的制约[3]。微生物除草剂因其对目标杂草选择性强、环境负荷小和安全性高等优势而成为近年来杂草生物防治研究中一个较活跃的领域。……