菊花MADS-box基因的克隆与表达载体构建

梁 芳，许申平，蒋素华，袁秀云，崔 波，张 静

（1.郑州师范学院生物工程研究所，河南郑州 450044；2.皂市高级中学，湖北天门 431703）

菊花MADS-box基因的克隆与表达载体构建

梁 芳1，许申平1，蒋素华1，袁秀云1，崔 波1，张 静2

（1.郑州师范学院生物工程研究所，河南郑州 450044；2.皂市高级中学，湖北天门 431703）

为了给菊花CmFUL基因功能鉴定与遗传改良奠定基础，采用RT-PCR法从菊花叶片中克隆出1个MADS-box A类基因的编码区序列，命名为CmFUL（GenBank登录号KT894379）。CmFUL基因编码区ORF片段长度为741 bp，编码246个氨基酸。CmFUL蛋白属于亲水性蛋白，预测该蛋白内含12个磷酸化位点和2个潜在的N-糖基化位点。氨基酸序列比对和系统进化树分析表明，Cm FUL蛋白与CMD41蛋白的相似性为95.6%，同属于AP1/FUL亚家族的FUL-like进化枝。实时荧光定量PCR分析表明，CmFUL基因在花期不同组织中均有表达，但表达丰度不一。在花蕾中表达量最高，其次是管状花，根和舌状花中痕量表达；同一朵花中管状花的表达量约为舌状花中的12倍。分析认为，CmFUL可能在促进开花及子房建成中起重要作用。将CmFUL基因连接到pCAMBIA1300载体上，成功构建了高效植物表达载体。

菊花；FUL-like；基因克隆；表达分析；生物信息学

花发育的第1步是花序分生组织向花分生组织的转变。花分生组织的诱导及花器官的形成受许多基因的联合调控，参与花发育的绝大多数基因均属于MADS-box基因。MADS-box基因是一个数量庞大且序列特异的调控基因家族，其编码的蛋白为转录因子，与靶基因的顺式作用元件结合，从而调控靶基因以特定的强度在特定的时间和空间表达。MADS-box基因广泛存在于植物中，在动物及真菌中也有发现。……