赵 帅,董文斌,李清平,康 兰,雷小平,周正颐
(西南医科大学附属医院新生儿科,四川泸州 646000)
沉默Pin1表达抑制高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭*
赵 帅,董文斌△,李清平,康 兰,雷小平,周正颐
(西南医科大学附属医院新生儿科,四川泸州 646000)
目的 通过沉默Pin1表达观察高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)核-浆穿梭改变。方法 在体外常规培养A549细胞及A549-Pin1shRNA细胞,随机分为对照组(常规培养)和高氧组、A549-Pin1shRNA细胞组(均给予高体积分数氧诱导细胞)。密闭培养24 h后,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态改变;免疫组织化学方法检测各组细胞中Caspase 3、 p53蛋白在各组细胞中的表达情况;免疫荧光法定位SIRT1核-浆穿梭变化。结果 对照组细胞生长状态良好,细胞呈梭形,活细胞数量较多。高氧组细胞生长状态差,细胞由原来的梭形变成椭圆形。A549-Pin1shRNA组细胞生长状态欠佳,贴壁欠佳,活细胞数量较高氧组有所增加,但是未达到对照组的水平。对照组密闭培养24 h,高氧组、A549-Pin1shRNA组通氧后密闭培养24 h后,对照组中Caspase 3、p53表达最少,与高氧组相比,差异有统计学意义(P<0.05);而A549-Pin1shRNA组在通氧后密闭24 h,Caspase 3、 p53表达介于对照组与高氧组之间,与各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在免疫荧光法定位SIRT1核-浆穿梭改变中,对照组未见SIRT1核-浆穿梭改变,而A549-Pin1shRNA组较高氧组减少。结论 抑制Pin1表达能够减少人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭。
肺泡;上皮细胞;细胞凋亡;Pin1;SIRT1;核-浆穿梭
随着医疗技术的不断发展,越来越多的治疗手段用于新生儿的救治过程,在救治过程中患儿往往需要长时间吸入高体积分数氧(高氧),可能引起肺部出现氧化应激反应、肺血管重构等,继而发展至肺纤维化及支气管肺发育不良(BPD)[1]。BPD仍是目前儿童慢性呼吸系统疾病中最主要的病因,其增加了儿童再入院率和病死率,严重影响儿童生长发育及生活质量[2]。……