消痰通腑方对结肠癌SW480细胞磷脂酶A2、环氧合酶2表达及细胞生物学行为的影响

胡学谦 朱童 王丹 魏品康

摘要：目的 观察消痰通腑方对结肠癌SW480细胞增殖、迁移的影响，探讨其分子作用机制。方法 采用不同浓度消痰通腑方作用结肠癌SW480细胞，CCK8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell小室实验检测细胞迁移能力，RT-qPCR检测磷脂酶A2（PLA2）和环氧合酶2（COX-2）mRNA表达，Western blot检测PLA2和COX2蛋白表达，RNA干扰技术沉默SW480细胞株中PLA2基因表达。结果 消痰通腑方低、高剂量组较对照组结肠癌SW480细胞增殖能力明显减弱（P<0.05），克隆形成率及迁移能力明显下降（P<0.05，P<0.01），PLA2、COX-2 mRNA和蛋白表达均明显下调（P<0.05），并呈浓度依赖性；与质粒对照组和对照组比较，PLA2 shRNA干扰组细胞PLA2和COX2蛋白表达明显下调（P<0.05）。结论 消痰通腑方可抑制结肠癌SW480细胞增殖和迁移，其机制可能与PLA2及COX-2的表达下调有关。

关键词：消痰通腑方；磷脂酶A2；环氧合酶2；结肠癌SW480细胞

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.014

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）08-0050-04

结肠癌是常见的恶性肿瘤，其发病率在男性和女性中分别位居第3位和第2位，且有逐年上升趋势[1]。

结肠癌属中医学“肠蕈”范畴，多因饮食失节、脾胃受损、湿热壅聚成痰而搏结肠腑所致。消痰通腑方为魏品康教授从痰论治消化道肿瘤核心治则“消痰散结八法”之一。磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）是一类可催化脂肪酸水解并产生以花生四烯酸（arachidonic acid，AA）为主的游离脂肪酸酶，具有产生炎性介质、参与细胞信号转导等多种功能，在人类肿瘤发生、发展中发挥重要生物效应[2]。环氧化酶（cyclooxygenase，COX）是PLA2催化AA生成生物活性分子的限速酶，包括COX-1和COX-2。研究表明，COX-2在结肠中过度表达，其与细胞增殖、分化等有关[3]。本研究采用消痰通腑方干预结肠癌SW480细胞，观察其对细胞增殖、迁移的影响，探讨其分子作用机制。

1 实验材料

1.1 细胞株

人结肠癌SW480细胞，中国科学院上海细胞库。

1.2 药物及制备

消痰通腑方由制半夏、制南星、大黄、陈皮、鸡内金、炙甘草组成，所有饮片由上海雷允上药业有限公司提供。……