品红亚硫酸法测定甲醇显色反应温度的确定

王灵红，广家权，王少磊，倪永培（安徽迎驾贡酒股份有限公司，安徽霍山237200）

品红亚硫酸法测定甲醇显色反应温度的确定

王灵红，广家权，王少磊，倪永培
（安徽迎驾贡酒股份有限公司，安徽霍山237200）

摘要：品红亚硫酸法是国标中测定白酒中甲醇的方法之一，但由于国标并未对该法中显色温度作出具体规定，只要求在20℃以上，导致不同温度条件下甲醇测试含量存在差异。通过对显色反应温度20～35℃共16个温度进行筛选比较，得到30℃最适合进行显色反应。该法标准曲线线性关系、重复性、稳定性和回收率都比较理想，并且简单易行，结果可靠。

关键词：测定方法； 品红亚硫酸法； 甲醇； 温度

作为世界知名的蒸馏酒，中国白酒源远流长，它的质量和消费者的生命健康密切相关［1-3］。GB 2757—2012《食品安全国家标准蒸馏酒及其配制酒》对蒸馏酒及其配制酒中甲醇的定义、标签标示以及技术指标都进行了明确规定。甲醇是一种麻醉性较强的无色液体，它经呼吸道和消化道吸收，也可部分被皮肤吸收，分布于脑脊髓、血、胆汁和尿中且含量较高。甲醇在体内氧化和排泄均缓慢，有明显的蓄积作用，对神经系统有麻醉作用，可导致机体代谢障碍，引起视网膜细胞、视神经损害及视神经脱髓鞘等［4-6］。白酒中的甲醇主要由酿酒原料和辅料中的果胶分解产生，发酵过程中甲醇含量都较低，不会对人体产生危害，但当以薯干、谷糠、野生植物等含果胶较多的原料代替谷物作为主要酿酒原料时，白酒中甲醇含量会升高［7］。GB/T 5009.48—2003《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》规定了白酒中甲醇的测定方法，包括气相色谱法和品红亚硫酸法。品红亚硫酸法具有操作简单、省时等优点，应用广泛，但由于其影响因素较多，导致标准曲线、回收率和精密度不是很理想。品红亚硫酸法中甲醇被氧化成甲醛后，在与品红-亚硫酸溶液反应形成醌类化合物的过程中，国标只规定了“于20℃以上静置0.5 h”，并未对“20℃以上”给出具体定值。本文通过把“20℃以上”这个模糊概念具体化，探讨了不同反应温度对甲醇标准曲线、回收率和精密度的影响，为采用品红亚硫酸法测定白酒中甲醇提供实验依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1样品

迎驾贡酒系列。

1.1.2仪器设备

TU1901紫外可见分光光度计，数显恒温水浴锅，酒精比重计，电子分析天平。

1.1.3试剂

甲醇纯度标准物质（中国计量科学院）；高锰酸钾，磷酸（85%），结晶水草酸（H2C2O4·2H2O），硫酸，碱性品红，亚硫酸钠，盐酸，无水乙醇，硝酸银，氢氧化钠等均为分析纯。

1.2实验方法

根据试样中乙醇浓度适当取样（乙醇浓度：30%vol，取1.0 mL；40%vol，取0.8 mL；50%vol，取0.6 mL；60%vol，取0.5 mL），置于25 mL具塞比色管中。

吸取0、0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL甲醇标准使用液（相当于0、0.05 mg、0.10 mg、0.20 mg、0.30 mg、0.40 mg、0.50 mg甲醇）分别置于25 mL具塞比色管中，并加入0.5 mL无甲醇的乙醇（60%vol）。

于试管及标准管中各加水至5 mL，再依次各加2 mL高锰酸钾-磷酸溶液，混匀，放置10 min，各加2 mL草酸-硫酸溶液，混匀使之褪色，再各加5 mL品红-亚硫酸溶液，混匀，于20℃以上温度下静置0.5 h，于590 nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。方法检出下限为0.02 g/100 mL。

2　结果与分析

2.1温度筛选实验

此实验测定了20～35℃共16个温度对甲醇标准曲线和精密度的影响，所用样品均为42%vol迎驾贡酒加标样，加入0.5 mg/mL甲醇标准溶液0.6 mL。结果见表1。由表1可知，30℃时甲醇标准曲线线性关系和标准差都优于其他温度，表明30℃最适合进行显色反应。图1 为30℃时用品红亚硫酸法测定甲醇标准溶液的线性回归图。

表1　不同温度对品红亚硫酸法测定结果的影响（x±s，n=3）

图1　甲醇溶液标准曲线

2.2不同酒精度对测定结果的影响

用30℃作为显色反应温度，分别测定了38%vol、40%vol、42%vol、45%vol、50%vol和60%vol迎驾贡酒加标样，分别加入0.5 mg/mL甲醇标准溶液0.6 mL，平行测定3次，数据见表2。由表2可知，用30℃作为显色反应温度，适合不同酒度白酒中甲醇的测定，标准曲线线性关系良好，精密度较高。

表2　不同酒精度对测定结果的影响（x±s，n=3）

2.3稳定性实验

取42%vol迎驾贡酒0.8 mL，分别加0.5 mg/mL甲醇标准溶液0.6 mL和0.8 mL，按样品测定方法，连续1 h内每隔10 min测1次吸光度值，将测定结果带入标准曲线计算出所得甲醇质量，检测其稳定性。结果显示，在显色30 min内结果稳定性较好，数据见表3。

表3稳定性实验结果（x±s，n=3）甲醇检测值（mg）加入甲醇（mg）0.3000 0.4000 0（min）0.3240 0.4100 10 0.3220 0.4080 20 0.3190 0.4110 30 0.3160 0.4040 40 0.2700 0.3680 50 0.2570 0.3560 60 0.2530 0.3380甲醇检测值（mg）前30 min 0.3200±0.0035 0.4080±0.0029 后30 min 0.2600±0.0093 0.3540±0.0150

甲醇标准溶液0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL，按样品测定方法，分别测定吸光度值，计算回收率，结果见表5。

表5　回收率实验结果（x±s，n=3）

3　结论

本研究基于国标中测定白酒甲醇含量的品红亚硫酸法中存在对显色温度没有作出具体规定，而显色温度对于检测的准确度存在影响的问题，通过线性拟合优度、稳定性、重复性和回收率等指标，研究确定30℃是品红亚硫酸法测定甲醇的适宜显色温度，提高了国标品红亚硫酸法测定白酒中甲醇的精确度，操作方法可靠。

参考文献：

［1］李改香.酒精及白酒中甲醇含量的测定［J］.安全技术，1995 （3）：26-29.

［2］张丽.饮用白酒中甲醇含量的测定［J］.才智，2013（5）：12-13.

［3］李永生，齐娇娜，高秀峰.酒中甲醇测定方法的研究进展［J］.酿酒科技，2006（1）：84-88.

［4］赵福岐，陈小全，周秀艳.甲醇及其对人体的危害［J］.中国科技信息，2008（10）：175-175.

［5］常春艳.白酒中甲醇对人体的危害［J］.中国检验检疫，1998（5）：37.

［6］牛桂芬.几种白酒中甲醇含量的测定［J］.中国酿造，2011（8）：167-168.

［7］陆华新，杨明茂，段奇翠，等.饮用酒中甲醇含量的一种现场快速分析方法［J］.公共卫生与预防医学，2006（3）：70-71.

优先数字出版时间：2016-04-01；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160401.1325.002.html。

中图分类号：TS262.3；TS261.4；TS261.7

文献标识码：A

文章编号：1001-9286（2016）07-0070-02

DOI：10.13746/j.njkj.2016037

收稿日期：2016-02-02

作者简介：王灵红（1987-），女，安徽黄山人，硕士研究生，主要从事食品检测和白酒酿造技术研究工作。

Determination of Chromogenic Reaction Temperature for the Detection of Methanol by Sulfurous-Acid-Magenta Method

WANG Linghong，GUANG Jiaquan，WANG Shaolei and NI Yongpei
（Anhui Yingjia Gongjiu Co.Ltd.，Huoshan，Anhui 237200，China）

Abstract:Sulfurous acid-magenta method is one of the methods for the detection of methanol in liquor.However，there are no specific provisions for chromogenic reaction temperature in national standards（only 20℃above required），different temperature will result in certain difference in the detection methanol content.In this study，a screening test for chromogenic reaction temperature（16 temperature values selected）at 20℃to 35℃was carried out and temperature at 30℃was the best choice for chromogenic reaction.The standard curve linearity，reproducibility，stability and recovery of the method was ideal and simple，and the results were reliable.

Key words:detection method；sulfurous-acid-magenta method；methanol；temperature