红花miR397a基因表达及对靶基因LAC2的调控作用

董园园，刘秀明，姚　娜，赵利旦，李海燕

(吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)



红花miR397a基因表达及对靶基因LAC2的调控作用

董园园，刘秀明，姚娜，赵利旦，李海燕

(吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)

[摘要]【目的】 研究红花miR397a前体基因及成熟基因在红花不同组织中的表达水平，并对miR397a基因序列、靶基因及基因功能进行分析，为深入研究红花抗逆机制提供参考。【方法】 提取红花籽粒、花瓣、茎、根、叶片等5个组织材料的总RNA，使用荧光定量PCR鉴定miR397a在不同组织中的表达水平；利用生物信息学方法分析红花miR397a基因序列，用原生质体转化方法验证红花miR397a调控的靶基因LAC2，并利用转基因拟南芥表型研究miR397a基因的功能。【结果】 miR397a前体基因和成熟基因均能在红花不同组织中表达，且均以叶片组织中的表达量最高，分别是籽粒组织的2.5与1.9倍，差异达极显著水平；miR397a序列在不同物种间高度保守，序列中仅存在 1～2个碱基的错配或缺失；miR397a对LAC2基因有调控作用，miR397a的过表达可引起LAC2表达水平降低，红花miR397a表达引起植物对NaCl的敏感性增加。【结论】 红花miR397a在叶片组织中的表达量最高，基因序列保守，且红花miR397a表达可增强植物对NaCl的敏感性。

[关键词]红花；miR397a；LAC2；转录后调控

microRNA(miRNA)是一类长度为18～24 nt的内源非编码小分子RNA，来源于具有颈环结构的单链microRNA前体基因内部，经RNA内切酶Ⅱ加工后从前体基因上释放并获得成熟基因。microRNA在转录后水平上与靶mRNA形成RISC复合物，通过诱导mRNA的降解或抑制蛋白翻译发挥转录调控功能[1]，从而参与植物的生长发育、开花时序、环境应激、组织特异性分化等生理活动[2]。……