枸杞子乙酸乙酯提取物急性毒性及对切除卵巢大鼠骨质疏松的防治作用

刘舵 杨永利 雷婷 陈宝东 张勇杰 明磊国*

1.西安组织工程与再生医学研究所，西安 710032 2.宁夏华宝枸杞产业有限公司，银川 750001

枸杞子(Fructus lycii)为茄科植物宁夏枸杞(Lycium barbarum)的成熟干燥果实，《本草纲目》中记载枸杞具有“坚精骨”的功效，《神农本草经》中也指出枸杞久服能“坚筋骨”，因此，枸杞子对骨质疏松的治疗存在一定的功效，例如枸杞中的枸杞多糖能够治疗去势雌性大鼠的骨质疏松[1]。然而，大量研究表明中药材中坚筋益骨的功效成分主要为黄酮类物质，如淫羊藿苷[2]、黄芪总黄酮[3]、蜂胶黄酮[4]、骨碎补黄酮[5]及大豆异黄酮[6]等。黄酮类物质被称为植物雌激素，近年来植物雌激素对绝经后妇女骨质疏松症的防治研究备受关注[7]。实验所用的枸杞子乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extraction from fructus lycii， EAEF)中黄酮类物质含量较高，可能对骨质疏松有一定的治疗作用。但EAEF属于粗提物，成分复杂，需要先进行急性毒性实验。研究中通过切除雌性大鼠卵巢复制绝经后妇女骨质疏松症，来研究EAEF防治骨质疏松的功效。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验动物：C57/BL6小鼠40只，雌雄各半，6～8周龄，清洁级，18～22 g。雌性SD大鼠40只，6周龄，清洁级，180～260 g。均购自第四军医大学实验动物中心，动物生产许可证号为SCXK(军)2012-0007。

1.1.2实验材料与药品：宁夏枸杞(Lycium barbarum)干果(宁夏华宝枸杞产业有限公司提供)，大豆苷元(纯度≥ 98%，上海源叶生物科技有限公司，批号Z27M6L1)。

1.1.3实验仪器：旋转蒸发仪RE-2002(巩义 宇翔)，真空冷冻干燥器2-4 LSC(德国 BMH Instruments)，Shimadzu GC 2010气相色谱仪(日本 岛津)，紫外-可见分光光度计UV-1601(北京 瑞利)，自动组织包埋机EG1150C(德国Leica)，组织切片机RM2125(德国 Leica)，光学显微镜BX41(日本OLYMPUS)，Micro CT Inveon(德国 Siements)。……