东方次睾吸虫PCR检测方法的建立及初步应用

那璐，高俊峰，2，仇建华，李荣，邵志辉，张艳，王春仁

（1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆163319；2.黑龙江省兽医科学研究所）

东方次睾吸虫PCR检测方法的建立及初步应用

那璐1，高俊峰1，2，仇建华1，李荣1，邵志辉1，张艳1，王春仁1

（1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆163319；2.黑龙江省兽医科学研究所）

为了快速准确地检测鸭、犬等动物东方次睾吸虫的感染情况，根据GenBank中发表的东方次睾吸虫ITS序列设计一对特异性引物，以粪便样品中虫卵DNA为模板，优化PCR反应条件，经过敏感性、特异性和重复性实验，建立检测动物粪便中东方次睾吸虫虫卵的方法。结果，阳性样品可扩增得到260 bp的特异性条带，华支睾吸虫、卷棘口吸虫、纤细背孔吸虫DNA样品检测均为阴性，检测到的最低虫卵数为0.031 25个/克粪便，表明研究建立的PCR检测方法具有较高的特异性和灵敏性。临床检测87份鸭粪样本，其中6份为阳性，阳性率为6.9%，结果显示大庆地区鸭子存在东方次睾吸虫感染，所建立的方法适合于鸭子及其他家禽东方次睾吸虫的检测。

东方次睾吸虫；PCR检测方法；建立；应用

东方次睾吸虫（Metorchis orientalis）隶属于后睾科（Opisthorchiidae）、次睾属（Metorchis），主要寄生于鸡鸭等禽类的胆管和胆囊内，也可寄生于犬、猫，人也有感染的报道［1-2］。该病主要流行于我国，福建、黑龙江、安徽等10多个省区有感染的报道［1-4］。动物感染后会出现胆囊高度肿大，肝胆区疼痛、腹痛、腹泻、体重减轻、消瘦、贫血等症状，严重时会导致死亡，给畜牧业造成很大经济损失。

目前对该病的诊断主要是传统的形态学观察，通过对虫体和虫卵进行形态鉴定来确诊。……