日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶D基因克隆及表达分析

张曼 ，程光平，苏永全，徐伊桦，冯文荣，王军，宋晓红，毛勇

(1. 广西大学 动物科学技术学院 广西高校水生生物健康养殖与营养调控重点实验室，广西 南宁 530005；2. 厦门大学 海洋与地球学院，福建 厦门 361005)



日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶D基因克隆及表达分析

张曼1，2，程光平1，苏永全2*，徐伊桦2，冯文荣2，王军2，宋晓红2，毛勇2

(1. 广西大学 动物科学技术学院 广西高校水生生物健康养殖与营养调控重点实验室，广西 南宁 530005；2. 厦门大学 海洋与地球学院，福建 厦门 361005)

摘要：组织蛋白酶D是溶酶体天冬氨酸蛋白酶家族的主要成员，广泛参与动物机体细胞内蛋白质的降解过程，对维持细胞稳态和正常代谢具有重要的作用。为研究组织蛋白酶D在甲壳动物非特异性免疫和幼体发育过程中的作用，本研究采用RACE技术首次克隆得到日本囊对虾组织蛋白酶D基因cDNA序列，命名为MjCatD，其中开放阅读框长为1 161 bp，编码386个氨基酸残基。序列分析和同源建模显示该基因编码的蛋白含有保守的N-糖基化位点、天冬氨酸蛋白酶签名序列、酶活化位点和非消化性组织蛋白酶D的特征序列，并且呈保守的双叶形结构。同源性比较和系统进化分析发现，MjCatD与斑节对虾、美洲螯龙虾和脊尾白虾相似性较高，并且与它们紧密聚为一支。实时荧光定量PCR结果显示，MjCatD基因在日本囊对虾多个组织中均有表达，其中肝胰腺中表达量最高。在白斑综合征病毒(white spot syndrome virus， WSSV)感染后3～24 h日本囊对虾肝胰腺中MjCatD的表达量逐渐下降，而在48 h急剧上调至最高表达量并且与对照组差异极显著(P<0.01)。此外，MjCatD基因在幼体发育不同阶段中也表现出明显的变化趋势。以上研究表明，MjCatD基因可能参与日本囊对虾先天免疫反应和幼体发育过程。

关键词：日本囊对虾；……