王 晴,李和权,周建英
(浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科,浙江 杭州 310003)
小鼠平滑肌祖细胞培养及其体内外迁移功能的研究
王晴,李和权,周建英
(浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科,浙江 杭州310003)
目的建立一种有效的小鼠平滑肌祖细胞的培养方法,并对其迁移功能进行研究。方法使用C57BL/6小鼠制备密质骨来源间充干细胞,PDGF-BB诱导其分化并采用形态学观察、免疫细胞化学染色及流式分析的方法进行鉴定。使用Transwell小室及流式分析方法检测其迁移能力。结果PDGF-BB诱导7 d后,镜下可见细胞呈长梭型,免疫细胞化学染色显示开始表达α-SMA。诱导21 d后,流式分析证实70%以上的细胞表达CD34+/α-SMA+双阳性,58.5%细胞开始表达SM-MHC。迁移实验表明,培养得到的平滑肌祖细胞在体内外均具有良好的迁移能力。结论通过使用密质骨来源间充干细胞制备平滑肌祖细胞具有操作简便、获取率高及培养周期短等优点,培养得到的平滑肌祖细胞在体内外均具有迁移能力,适于进行后续功能及机制研究。
平滑肌祖细胞;间充干细胞;培养;迁移;平滑肌肌动蛋白;PDGF-BB
血管重塑主要包括血管新生及血管平滑肌层病理性增厚,是导致动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、移植血管病等众多血管增殖性疾病发病的重要因素,探索新生及增生平滑肌细胞的来源和重塑机制,寻找其干预的靶点一直是学者们关注的焦点问题[1-4]。近来,随着平滑肌祖细胞在外周血中的发现,增多的平滑肌细胞可能部分来源于骨髓的观点越来越受到人们的重视。……