问荣荣,王步勇,马玲
(东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨 150040)
舞毒蛾LdGSTe1基因的克隆及表达
问荣荣,王步勇,马玲*
(东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨 150040)
从舞毒蛾(Lymantria dispar)3龄幼虫转录组文库中鉴定获得舞毒蛾谷胱甘肽S-转移酶基因全长cDNA,命名为 LdGSTe1。该基因全长 651 bp,编码 216个氨基酸。序列分析显示,LdGSTe1蛋白氨基酸序列含有GST_C_Delta_Epsilon与GST_N_Delta_Epsilon 2个保守结构域,属于类硫氧还蛋白和谷胱甘肽S-转移酶2个超家族。系统进化树分析表明,舞毒蛾LdGST蛋白属于GST Epsilon家族。蛋白结构显示,LdGSTe1蛋白包含一个N端和一个C端结构,α-螺旋与β-折叠为主要结构元件。实时荧光定量PCR结果表明,在4.0、10.0 mg/L鱼藤酮药剂处理下,舞毒蛾3龄幼虫LdGSTe1基因表达先下降后上升,推测该基因参与舞毒蛾解毒应答。
舞毒蛾;谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因;克隆;基因表达
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谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)是由多个基因编码的具有转运、信号传导、解毒功能的超家族酶系,广泛存在于动物、植物和微生物体内[1-2]。依据细胞定位,GSTs可分为微粒体型、线粒体型和胞质型。基于分布广泛和功能重要的特点,胞质GSTs成为研究最为广泛和深入的类型。昆虫胞质GSTs 的主要功能是催化谷胱甘肽的巯基和一些毒亲电子类物质(如杀虫剂、醌类化合物、α,β-不饱和羰基化合物及过氧化物等)进行轭合反应,以及作为配体结合蛋白以俘获有毒物质,行使解毒功能,参与杀虫剂抗药性的形成[3]。Chelvanayagam 等[4]将昆虫胞质 GSTs 分为3类:第Ⅰ类为 Delta 亚族;第Ⅱ类分别为 Sigma、Omega、Theta 和 Zeta 4 个亚族;第Ⅲ类为 Epsilon亚族,其中Delta和Epsilon为昆虫所特有,且 Delta亚族存在于所有昆虫中,而 Epsilon 亚族仅在双翅目、鞘翅目、鳞翅目昆虫中出现。……