李 明,宋永周,王 斌,童九辉,袁 鹤,马 维
(河北医科大学第二医院骨科,河北 石家庄 050000)
·论著·
镁离子对大鼠雪旺细胞增殖及NGF分泌的影响
李明,宋永周,王斌,童九辉,袁鹤,马维*
(河北医科大学第二医院骨科,河北 石家庄 050000)
[摘要]目的观察镁离子对体外培养大鼠雪旺细胞(Schwann cells,SCs)增殖及神经生长因子(nerve growth factor,NGF)分泌的影响。方法选取出生3~5 d SD大鼠,分离双侧坐骨神经行SCs体外培养,用S-100免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度。取对数生长期SCs分别加入含不同浓度MgCl2(0、0.5、1、2 mmol/L)和10%FBS的DMEM培养基。分别于第2、4、6、8天,MTT法检测SCs增殖情况,ELISA法检测细胞分泌NGF水平。结果经双30 min差速贴壁法,可以去除大部分成纤维细胞。原代培养的SCs,接种24 h后即可贴壁生长。在培养的第72 h细胞胞体出现并肩平行排列的趋势,第7天可见细胞聚合。经免疫组织化学检测计数,培养6 d后的SCs,其纯度达到91%。各组SCs增殖活力均呈上升趋势(A组上升幅度最大,C组上升幅度最小),各组分泌的NGF水平至第6天达峰值后均下降(A组上升幅度最大,C组上升幅度最小),4组组间、不同时点间、组间·不同时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。 结论适宜浓度的MgCl2对体外培养大鼠SCs的增殖和分泌功能有促进作用。
[关键词]镁;雪旺细胞;神经生长因子;大鼠
doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.07.001
雪旺细胞(Schwann cells,SCs)是构成周围神经系统中特有的胶质细胞。不仅参与髓鞘的形成,还在周围神经损伤后,通过自身快速增殖、分裂以及分泌各种蛋白分子维护轴突的生长环境,促进神经的自我修复及再生。镁离子是细胞正常代谢所必需的离子之一,在细胞中含量丰富,在体内参与几百种酶反应。在局部微环境中,镁离子作为细胞第二信使具有调节线粒体钙缓冲能力,同时具有抗凋亡、抗氧化及抗炎作用,对于神经冲动的传导,也具有重要意义[1]。……