盐酸抗原修复Brdu免疫组化检测在脑组织中的应用*

王　坦　郑婉君　高剑峰



【实验研究】

盐酸抗原修复Brdu免疫组化检测在脑组织中的应用*

王坦1郑婉君2高剑峰2

1.河南中医学院基础医学院病理教研室(郑州 450000); 2.河南中医学院基础医学院生理教研室(郑州 450000)

摘要：目的探索简单有效的Brdu免疫组织化学染色抗原修复方法，提高实验成功率和改善实验结果。方法通过实验对三种抗原修复方法：①水浴锅煮沸修复法，②微波修复法，③Hcl酸化破膜法，采集图像进行比较，探索出Brdu免疫组织化学DAB染色最有效方法。结果①水浴锅煮沸修复法：组织抗原暴露不全，背景较深，不能很好的显示Brdu的阳性结果。②微波修复法：组织中Brdu暴露不全，增加加热时间会使组织切片脱落严重，加热时间少则背景深，Brdu不能很好的与抗体结合，实验多数为阴性。③Hcl酸修复法：组织背景色较浅，Brdu阳性与背景色对比明显，同时能完全检测Brdu在细胞中的位置。结论Hcl酸化修复法能很好的显示细胞核DNA镶嵌的Brdu，抗体容易进入细胞核中与之结合，显色效果明显，操作简单易行，同时无热源，安全性较好，是一种较为理想的检测方法。

关键词：Brdu; 免疫组织化学；抗原修复

Brdu(5-Bromo-2-deoxyUridine 5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸)是一种参与细胞DNA(脱氧核糖核酸)合成的核苷酸类物质，一般Brdu作为跟踪剂用于细胞周期检测、细胞分裂增生和DNA合成检测[1]。细胞周期包括分裂期和分裂间期，在分裂间期的S期为DNA合成期，细胞核内DNA进行半保留复制，加入Brdu后，Brdu可进入新合成的DNA链中，在不受紫外线照射细胞存活情况下可以永久存在。……