陈绍博,曾巧英(.甘肃省兽医局,甘肃 兰州 730030;2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730030)
猪瘟病毒E0基因检测方法的建立及甘肃河西地区E0基因特征分析
陈绍博1,曾巧英2*
(1.甘肃省兽医局,甘肃 兰州 730030;2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730030)
为给甘肃地区猪瘟的防控和检测提供参考资料,本研究根据典型猪瘟病毒的E0基因设计引物,建立猪瘟RT-PCR检测方法,并评估其特异性,同时用该方法检测甘肃河西地区猪瘟的流行状况,通过基因测序分析E0基因序列特征。建立的猪瘟RT-PCR检测方法对猪瘟病毒cDNA检测为阳性,而对其他病毒cDNA检测为阴性,甘肃省河西地区猪瘟流行广泛存在,流行率为26.92%,且流行毒株核苷酸同源性为80.2%~96.3%;氨基酸同源性为73.0%~95.4%。结果表明本研究建立的猪瘟RT-PCR检测方法特异性强,且甘肃河西地区猪瘟的流行毒株E0基因进化高度保守。
猪瘟;RT-PCR;E0;甘肃
猪瘟(Classical swine fever,CSF) 是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的急性病毒学传染病,具有较高的发病率和死亡率[1-3]。世界各国均有CSF分布,其中养猪较多的国家感染更为严重,可造成严重的农业经济损失[2]。CSFV为含有一个正向单链RNA且被囊膜包裹的病毒粒子,分类学上属于黄病毒科、瘟病毒属重要成员。CSFV基因组长度约为12.3 kb,但在长期流行过程中,CSFV的稳定性较高,仅有较少的核苷酸发生改变[4,5],其中E0基因作为一种具有多功能的结构蛋白,可编码糖膜,诱导机体产生中合体[6],长期进化过程中E0一直保持RNase活性,介导宿主淋巴细胞的凋亡而使宿主产生免疫抑制导致持续感染[6],这些机制表明CSFV感染致病过程中E0基因发挥着重要作用。……