27批红花柠檬黄、酸性红73、胭脂红染色及掺伪的检测

胡　佳　郭　琳　何　涛



27批红花柠檬黄、酸性红73、胭脂红染色及掺伪的检测

胡佳郭琳何涛

辽宁省锦州市食品药品检验所(锦州 121000)

摘要：目的对红花染色掺伪进行检测。方法水试鉴别红花掺伪，薄层色谱法对红花染色进行初步判定，再利用高效液相二极管阵列检测器分析红花中的染色成分。结果27批红花样品中有18批红花掺有白色粉末，8批红花检测出含有胭脂红染色剂，4批含有酸性红73染色剂。结论薄层色谱法和高效液相二极管阵列检测器可以对红花中柠檬黄、酸性红73和胭脂红进行有效的鉴别。

关键词：红花；柠檬黄；酸性红73；胭脂红

红花为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥管状花，又名红蓝花、草红花，性温、味辛，具有活血通经，祛瘀止痛的功效，主治妇女月经不调，还是用静脉曲张，末梢神经炎，血液循环不好，腿脚麻木或青紫等瘀血证[1]。近年，由于红花来源有限，价格上涨，造假、掺伪的情况较为严重，常有不法人员掺入其他物质并染色伪装，或把质量较差的饮片染色充当优品[2]。染色剂的加入严重影响疗效，危害人体健康[3]。如酸性红73为食品禁用色素，具有致癌性。胭脂红极易损害肝脏，大量累积后，也会致癌[4]。本文采用薄层色谱和高效液相色谱判定研究了红花中的染色，内容如下。

1　实验材料

1.1样品取市售红花饮片共27批，批号分别为20120101、110916、1201002、1103001、20111015、120501、110916、1201002、101209、120101、111202、120510、120610、120501、20120520、1103001、120320、20101204A、20120318、20120603、120308、110508、20120110、1201002、110843200、110958522、1207001。

1.2仪器与试药赛多利斯 BP211D 电子天平(德国赛多利斯)，日立L-2000液相色谱仪(日本日立)，KQ-5200超声波清洗器(昆山超声)。

胭脂红对照试剂(中国药品生物制品检定所，批号111771-200701)、酸性红73对照试剂(中国药品生物制品检定所，批号111773-200701)、柠檬黄对照试剂(北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司，批号100158)、红花对照药材(中国药品生物制品检定所，907-8903)、其它试剂为分析纯，甲醇为色谱纯，水为纯化水。

2　方法与结果

2.1外观性状鉴别结果显示27批红花,18批水浸液底部有明显类白色或褐色沉淀。见表1。

表1　外观性状鉴别结果

2.2薄层色谱鉴别

2.2.1金橙Ⅱ的薄层鉴别取红花样品各2 g，加入70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰乙酸(7:1:2)为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视。结果显示27批红花样品均未显示与金橙Ⅱ相对应的斑点。

2.2.2柠檬黄、酸性红73和胭脂红的薄层鉴别[5]取红花样品各2 g，加入70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取柠檬黄、酸性红73和胭脂红对照试剂适量，加70%乙醇分别制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水(1∶3∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视。结果显示批号为120101、120308、120501、1207001的样品与柠檬黄和酸性红73对照试剂相应的位置上显相同颜色的斑点，批号为110508、20120110、1201002、20120520、1103001、120320、20101204A、20120318的红花与柠檬黄和胭脂红对照试剂相应的位置上显相同颜色的斑点。结果见图1。上述12批样品染色情况用高效液相色谱法进一步判断。

1.柠檬黄对照试剂; 2.酸性红73对照试剂; 3. 胭脂红对照试剂; 4. 批号120101; 5. 批号110508; 6. 批号2012110; 7.批号1201002; 8. 批号120308; 9. 批号20120520; 10. 批号1103001; 11. 批号120320; 12. 批号120501; 13. 批号20101204A; 14. 批号1207001; 15.批号20120318图1　薄层色谱图

2.3高效液相色谱检查

2.3.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.05mol/L醋酸铵为流动相A，0.05mol/L醋酸铵为流动相B，按表1进行梯度洗脱，检测波长为432nm、508nm。432nm下检测柠檬黄，508nm下检测酸性红73与胭脂红。

表2　梯度洗脱程序

2.3.2结果批号为120101、120308、120501、1207001的样品与酸性红73对照试剂相应的位置上显相同保留时间的色谱峰，紫外-可见吸收光谱基本一致。(见图3、图4、图5、图6、图7)批号为110508、20120110、1201002、20120520、1103001、120320、20101204A、20120318的红花与胭脂红对照试剂相应的位置上显相同保留时间的色谱峰，紫外-可见吸收光谱基本一致。以1201002样品为例(见图8、图9、图10、图11)。而4批红花样品在与柠檬黄对照试剂相应的位置上显相同保留时间的色谱峰，但紫外-可见光谱不一致，说明柠檬黄的薄层色谱为假阳性结果。

图3　对照药材色谱图(508nm)

图4　酸性红73色谱图(508nm)

图5　批号120308样品色谱图(508nm)

图6　酸性红73对照试剂紫外-可见光谱图

图7　批号120308样品光谱图

图8　胭脂红对照试剂色谱图(508nm)

图9　批号1201002样品色谱图(508nm)

图10　胭脂红紫外-可见光谱图

图11　批号1201002样品光谱图

3　讨论

3.1按照国家食品药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2007009对红花中金橙Ⅱ染色剂进行检查，结果27批红花均为阴性结果。说明不法分子在获悉后，改变了红花中的染色剂。

3.227批红花按照水试结果，18批含有白色或褐色粉末，而且部分明显同时含有染色剂，故选择柠檬黄、酸性红73和胭脂红为对照，依据薄层色谱法和二极管阵列检测器，检查8批红花中含有胭脂红，4批红花含有酸性红73，红花的染色和掺伪问题仍很严峻。

参考文献

[1]顾峥嵘.红花及其伪品性状及理化鉴别[J].时珍国医国药，1999，10(6)：446.

[2]宋大丽，于文敏.红花掺伪的鉴别方法[J].首都医药，2009,16(13)：39.

[3]闵春艳.红花药材掺伪染色检测方法的实验研究[J].中国药事，2011,25(8)：772.

[4]栾洁.红花饮片染色掺伪品的检测方法探讨 [J].安徽医药，2012,16(7)：917.

[5]国家食品药品监督管理局.中药材及中药饮片药品检验补充检验方法和检验项目批准件.No：2007009.2007,5,16.

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.11.020

文章编号：1003-8914(2016)-11-1561-03

收稿日期：(本文校对：李盈2015-11-09)

Detection of Tartrazine, Acid Red 73 and Carmine in 27 Patch of Safflower

HU JiaGUO LinHE Tao

(Jinzhou Institute for Food and Drug Control, Liaoning, Jinzhou 121000, China)

Abstract：ObjectiveTo study on identification of safflower dyeing composition. MethodsUsing thin layer chromatography (TLC) to preliminary judgment of dye safflower, recycle the dyeing ingredient in red diode array detector and HPLC analysis. Results18 batches of safflower mixed with white powder. 8 batches of safflower contained carmine, 4 batches of safflower contains acid red 73. ConclusionTLC and high performance liquid diode array detector can be effective identification for tartrazine, acid red 73, carmine in safflower.

Key words：Safflower; Tartrazine; Acid red 73; Carmine