癌性胸腹水中IL-2、IL-4、TNF-α细胞因子水平的分析研究

赵秘胜，夏雯丽，王海坚（温州市人民医院，浙江 温州325000）

癌性胸腹水中IL-2、IL-4、TNF-α细胞因子水平的分析研究

赵秘胜，夏雯丽，王海坚
（温州市人民医院，浙江 温州325000）

目的研究癌性胸腹水与胸腹水漏出液中细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平，以此探讨肿瘤患者的机体免疫状态。方法选择50例癌性胸腹水和30例胸腹水漏出液，采用ELISA法测定细胞因子IL-2、IL-4水平，采用化学发光免疫分析法测定TNF-α水平。结果与胸腹水漏出液比较，癌性胸腹水中IL-4、IL-2、TNF-α水平升高，差异具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论癌性胸腹水与胸腹水漏出液中细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α水平存在显著性差异，对肿瘤患者机体内的免疫状态具有一定提示作用，为患者的治疗提供参考。

IL-2；IL-4；TNF-α；癌性胸腹水；胸腹水漏出液

胸水和腹水是提示恶性肿瘤侵袭以及转移的重要标志。在癌性胸腹水中，除Th1及Th2异常升高外，单核-巨噬细胞的比例也较高，有的甚至占细胞总数的30%左右［1-2］。一般将TNF-α归为单核-巨噬细胞型细胞因子，将IL-2、IL-4分别归为Th1、Th2型细胞因子。当机体Th1型细胞因子占优势时，机体正处于良好的抗肿瘤状态；当机体Th2型细胞因子占优势时，通过抑制干扰素-γ （IFN-γ）和自然杀伤细胞（NK细胞）的活化，从而抑制机体的抗肿瘤效应。肿瘤患者体内Th1/Th2平衡状态已受到当今国内外专家学者的重视［3］，并有望成为预测肿瘤预后的重要指标之一。本文通过对癌性胸腹水中IL-2、IL-4、TNF-α水平的检测，以提示肿瘤患者机体内的免疫状态，为临床治疗提供更多信息。

1　资料与方法

1.1一般资料收集本院2011年7月～2015年7月的80例胸腹水患者，男64例，女16例，年龄24～91岁，平均（66.5±15.2）岁，按积液性质分为两组：（1）胸腹水漏出液组：30例，男25例，女5例，年龄45～91岁，平均（62.8±11.8）岁，其中21例肝硬化，9例心功能不全。胸腹水生化均符合Light标准、胸腹水常规检查 （细胞数＜100×106/L，镜检未见异常细胞）、临床表现及治疗结果确诊为漏出液；（2）癌性胸腹水组：50例，男39例，女11例，年龄24～87岁，平均（69.6±17.2）岁，其中肝癌5例，肺癌36例，卵巢恶性肿瘤7例，腹膜恶性肿瘤2例，全部经病理组织活检及胸腹水标本中找到肿瘤细胞确诊，标本收集前均未作放疗、化疗治疗。两组性别、年龄构成差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1仪器与试剂IL-2、IL-4试剂盒均由上海哈灵生物科技有限公司提供，TNF-α试剂盒由西门子医学诊断产品有限公司提供，仪器为西门子化学发光免疫分析仪（Immulite 1000）。

1.2.2实验方法入院后B超引导下胸腹水定位检查，使用专用穿刺包和EDTA-K2抗凝的胸腹水专用管，经胸腹腔穿刺术无菌抽取患者胸水或腹水约10mL，1500转/min离心5分钟，取上清液，按每次用量分装后，置于-70℃低温冰箱冷冻保存待测。采用ELISA法测定两组IL-2、IL-4水平，操作步骤严格按照说明书进行。在Immulite1000上使用化学发光免疫分析原理测定两组TNF-α水平。

1.3统计学处理用SPSS18.0统计软件进行统计分析。计量资料以（x±s）表示，两组间比较采用t检验。

2　结果

与胸腹水漏出液比较，癌性胸腹水中IL-4（t= 3.790，P=0.001）、IL-2（t=2.568，P=0.015）、TNF-α （t=2.592，P=0.016）水平升高，差异具有统计学意义，结果见表1。

表1　胸腹水中IL-2、IL-4、TNF-α浓度比较（x±s，pg/mL）

3　讨论

IL-2是主要由Th1型细胞产生的具有广泛生物活性的细胞因子，是T细胞亚群的生长因子，并可促进活化B细胞的增殖，是调控机体免疫应答的重要细胞因子；同时IL-2也可参与抗体反应、造血以及肿瘤监视［4］。体外实验表明［5］，其抗肿瘤机理在于剌激、活化效应细胞，对抑制肿瘤细胞的生长转移具有一定作用。目前临床上有用IL-2联合化疗药物治疗癌性胸腹水，取得了良好的疗效。同时，肿瘤组织分泌Th2类细胞因子，机体处于Th2细胞占优势状态是肿瘤免疫逃逸的机制之一，Th2细胞主要分泌IL-4、IL-10、IL-13，抑制细胞免疫的抗肿瘤效应，其主要通过抑制NK细胞的活化和降低抗原提呈细胞的表达，从而导致机体抗肿瘤的免疫功能减弱，使肿瘤细胞逃逸免疫监视以及免疫攻击，来实现对肿瘤细胞的保护作用［6］。在癌性胸腹水中，除Th1及Th2型细胞异常升高外，单核-巨噬细胞的比例也较高，而TNF-α是一种主要由单核-巨噬细胞产生的促炎性细胞因子，参与机体炎症反应和免疫反应，是一种能够直接杀伤肿瘤细胞并对正常细胞无明显毒性的细胞因子，是迄今为止发现的直接杀伤肿瘤最强的生物活性因子之一。TNF-α通过与靶细胞膜上肿瘤坏死因子受体（TNFR）结合，以增强单核-巨噬细胞对肿瘤抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（ADCC效应），而达到抗肿瘤的目的。目前国内有学者发现TNF-α能降低内皮细胞膜钙黏蛋白的表达和激活丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的活性［7］，以达到增加血管内皮细胞通透性的目的，这有利于TNF-α通过血管壁渗入胸腹腔内，这些原因都有可能会导致癌症患者胸腹水中TNF-α水平的增高。

本文对癌性胸腹水和胸腹水漏出液中部分细胞因子的水平进行检测，对肿瘤患者体内的免疫状态具有一定的提示作用。本文结果显示，癌性胸腹水IL-2、IL-4、TNF-α水平高于胸腹水漏出液。其原因可能是由于肿瘤的刺激，使得机体内Th1型细胞增多，分泌IL-2水平升高，以达到抗肿瘤的作用，但由于肿瘤细胞的免疫逃逸作用，导致Th2型细胞异常增高，分泌IL-4水平升高，使得Th2类细胞占优势，在一定程度上抑制Th1类细胞，产生Th1/Th2漂移，使得肿瘤细胞通过这一机制而逃离宿主的免疫攻击［8］。

综上所述，检测癌性胸腹水中 IL-2、IL-4、TNF-α细胞因子水平，有助于了解癌症患者机体免疫状态，且对临床上使用细胞因子抗肿瘤治疗提供一定依据。

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温州市卫生局科研基金资助项目（2011B025）