ADAM10处理增强铜离子诱导的重组朊蛋白的蛋白酶抗性

陈操 吕燕 石琦 董小平

102206北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所朊病毒室传染病预防控制国家重点实验室

论 著

ADAM10处理增强铜离子诱导的重组朊蛋白的蛋白酶抗性

陈操 吕燕 石琦 董小平

102206北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所朊病毒室传染病预防控制国家重点实验室

目的 分析ADAM10对铜离子诱导后的PrP蛋白的剪切特点。方法 常规方法表达、纯化人PrP全长蛋白（aa 23-230），利用氯化铜对纯化后的 PrP蛋白进行诱导。用不同浓度的ADAM10对PrP蛋白进行处理，检测诱导后全长蛋白及剪切片段的PK抗性。结果 重组人PrP蛋白经Cu2+诱导后具有部分抵抗PK消化的特点。Cu2+诱导后的PrP蛋白可被ADAM10剪切，具有剂量依赖性。ADAM10对Cu2+诱导的PrP蛋白处理后抵抗PK消化的能力明显加强。结论 ADAM10可以剪切Cu2+诱导的PrP蛋白，同时增加了处理后PrP蛋白的PK抗性。

【主题词】 朊蛋白；铜离子；去整合素金属蛋白酶10；蛋白酶抗性；剪切

Fund programs：Nationa1 Natura1 Science Foundation of China（81401670，81572048，81301429）；SKLID Deve1opment Grant（2012SKLID102，2015SKLID503）

传播性海绵状脑病（transmissib1e spongiform encepha1opathies，TSEs）是一类可以感染人类和动物的神经退行性疾病［1］。目前研究认为，TSEs病原是一种异常形式的朊蛋白—朊病毒，故该病又称为朊病毒病（prion disease）。该类疾病的发病机制目前认为是正常的细胞型朊蛋白（PrPC）转变为空间构型异常的、不溶的及具有部分蛋白酶抗性的异常朊蛋白（PrPSc），它能够在受感染的脑组织中沉积，引起神经元的退行性变，最终导致患者死亡［2］。成熟的PrPC是一种通过其 C端的糖基磷脂酰肌醇（g1ycosy1phosphatidy1inosito1，GPI）锚定于细胞膜外表面的糖蛋白［3］。

近些年对该病的研究发现，二价金属离子如铜离子、锰离子及锌离子参与到了PrPC向PrPSc的转化过程中。……