重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展

樊晓旭，赵永刚，李　林，吴晓东，王志亮（中国动物卫生与流行病学中心，外来病研究中心，山东青岛　266032）

重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展

樊晓旭，赵永刚，李林，吴晓东，王志亮
（中国动物卫生与流行病学中心，外来病研究中心，山东青岛266032）

重组酶聚合酶扩增技术（RPA）是近年来开发的核酸扩增技术，在保证灵敏、特异的同时，操作简单、耗时短，能够在常温下10～20分钟内对靶DNA进行扩增，对实验设备、资源的要求低，适用于兽医、食品安全、生物防御、农业等领域的快速诊断。本文介绍了该技术的原理及目前在病毒、细菌、寄生虫等病原检测方面的应用，展望了其现场检测方面的应用前景。

重组酶聚合酶扩增；快速诊断；应用

1　引言

1985年，美国PE-Cetus公司发明了具有划时代意义的聚合酶链式反应（PCR）。该原理类似于DNA的体内复制，反应通过变性、退火、延伸三个步骤，在基于靶序列两端互补的特异性寡核苷酸引物参与下，实现DNA的体外合成和扩增。现在，由英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增技术（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），对核酸扩增技术进行改进［1］。相比经典PCR技术，RPA技术主要优势之一在于等温。常规PCR必须经过不同温度环节，而RPA反应在常温下即可进行反应，甚至人体体温即可提供反应所需的温度环境，其最适温度在37～42 ℃。优势之二在于检测耗时短。整个过程在10～20分钟内即可完成，且无需变性，不仅大大缩短了检测反应时间，也无需与PCR仪类似的专门温控设备，从而实现了便携式快速核酸检测。……