家蚕血淋巴体外黑化观察及相关黑色素合成催化酶基因

李田，张亮，申琦，赵威，李黎，吕银，蒋贵兵，闫登峰，肖俊杰，陈萍

1 西南大学 生物技术学院，重庆 4007162 重庆市蚕业管理总站，重庆 400716

农业生物技术

家蚕血淋巴体外黑化观察及相关黑色素合成催化酶基因

李田1，张亮1，申琦1，赵威1，李黎1，吕银1，蒋贵兵2，闫登峰1，肖俊杰1，陈萍1

1 西南大学 生物技术学院，重庆 400716
2 重庆市蚕业管理总站，重庆 400716

李田， 张亮， 申琦， 等. 家蚕血淋巴体外黑化观察及相关黑色素合成催化酶基因. 生物工程学报， 2016， 32（8）: 1093-1103.

Li T， Zhang L， Shen Q， et al. In vitro observation of haemolymph melanization and melanin-related biosynthesis enzyme genes in silkworm， Bombyx mori. Chin J Biotech， 2016， 32（8）: 1093-1103.

观察不同生长期家蚕幼虫血淋巴在体外的黑化速度和对大肠杆菌生长的影响结果显示，随食桑生长幼虫血淋巴的黑化速度逐渐变快，对大肠杆菌生长的抑制作用逐渐增强。RT-PCR实验显示，黑色素合成催化酶BmTan、BmPo-1、BmYellow-f和BmDdc等的基因在家蚕5 L 3 d血淋巴中表达量高，BmBlack、BmYellow 和BmPah等的基因也有明显表达。qPCR分析显示，黑化病蚕中Bmtan、Bmddc、Bmyellow、Bmebony和Bmblack，尤其Bmddc表达发生了显著上调。与对照相比，Ddc酶的抑制剂能显著抑制脂多糖对血淋巴的诱导黑化作用。用大肠杆菌注射家蚕幼虫，血淋巴中多巴和多巴胺的含量明显上升。这些表明家蚕幼虫血淋巴黑化与防御免疫有关，Bmddc很可能在幼虫血淋巴的免疫黑化中发挥作用。

家蚕血淋巴，黑化反应，黑色素合成催化酶，免疫应答

昆虫是地球上最庞大的生物种群，分布于除深海外的各种自然环境中［1］，具有极强的环境适应能力和防御免疫能力。昆虫为开放式血液循环，所有组织器官浸浴在血淋巴中，当外源物攻破昆虫体壁这个物理屏障后，首先面对的是血淋巴，血淋巴是昆虫免疫防卫的重要组织。……