高温诱导人ECV304的凋亡及其信号传导通路

朱晔晶，彭宁，凌杰，赵兵

高温诱导人ECV304的凋亡及其信号传导通路

朱晔晶，彭宁，凌杰，赵兵

目的 探讨不同温度对人ECV304凋亡的影响以及在凋亡过程中caspase家族所起的作用。方法 应用MTT法、Hochest33342/pI荧光双染、流式细胞术分析高温对人ECV304细胞诱导凋亡的影响；比色法测定高温诱导人ECV304凋亡过程中caspase-3、caspase-8、caspase-9活性变化。结果 39℃对细胞影响不明显，41℃、43℃处理后细胞凋亡明显增多，凋亡过程中，caspase-3活性与细胞凋亡率成正相关，caspase-8、caspase-9活性无明显变化。结论 高温对人ECV304有诱导凋亡作用，caspase-3在人ECV304凋亡过程中起重要作用。

细胞凋亡；热处理；caspase活性；人ECV304

高热环境对机体各个系统均有不同程度的损害，极端热环境可以导致某些蛋白结构和功能改变，导致体能减弱甚至死亡[1]。高热诱导机体细胞损伤程度与热的程度相关，极度高温（49～50℃以上）可导致细胞在5 min内以坏死方式死亡，而当环境温度在41.6～42℃时，细胞死亡方式以凋亡为主[2]。血管内皮细胞广泛分布于机体各个部位，研究发现，其是热打击时重要的反应细胞，也是最早发生损伤的细胞[3]。研究也证实，内皮细胞结构及功能损伤是引发多器官功能障碍综合征等严重并发症的重要因素[4]。本实验通过研究高热对内皮细胞凋亡的影响，为高温环境下作业人群健康体能的防护提供理论依据。报道如下。

1 资料与方法

1.1 主要仪器与细胞株 FormaSeriesⅡ隔水式CO2培养箱为美国Thermo公司；Nikon Eclipse TS100倒置显微镜来自日本Nikon公司；人脐静脉内皮细胞株（human ECV304）由温州医科大学惠赠。

1.2 主要试剂及耗材 RPMI1640培养基为美国Gibco公司产品；……