消癌平辅助丝裂霉素对肺癌细胞化疗增效的研究

谢泽新　杨杨　王金烁



·论著·

消癌平辅助丝裂霉素对肺癌细胞化疗增效的研究

谢泽新杨杨王金烁

目的通过消癌平联合丝裂霉素对肺癌A549细胞增殖，细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响，探讨化疗增效机制。方法MTT检测消癌平(2、8、21 μl/ml)联合丝裂霉素(2 μg/nl)对肺癌A549细胞生长抑制(联合用药A、B、C组)，并设立对照组、丝裂霉素组和消癌平组；流式细胞术检测细胞周期及凋亡；RT-PCR检测P53、CyclinD1基因表达。结果MTT检测显示在24、48、72 h联合用药A、B、C组OD(光密度)均比丝裂霉素低(P<0.05)；流式细胞术检测表明消癌平、丝裂霉素与对照组相比，肺癌细胞均阻滞于G0/G1期，差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组G0/G1期细胞比率、细胞凋亡率与丝裂霉素组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。消癌平组、丝裂霉素组与对照组比较，均能提高P53 mRNA 表达(P<0.05)，联合治疗组P53 mRNA 表达高于丝裂霉素组(P<0.05)。消癌平组、丝裂霉素组与对照组比较均能降低Cyclin D1基因的表达(P<0.05)。与丝裂霉素组比较，联合用药可显著减低CyclinD1基因的表达(P<0.05)。结论消癌平辅助丝裂霉素对肺癌细胞化疗增效可能与上调P53 mRNA表达，增强细胞凋亡作用，以及下调CyclinD1 mRNA表达，阻滞细胞周期于G0/G1期有关。

消癌平;丝裂霉素;细胞周期;凋亡;Cyclin D1;P5

研究显示，60%～80%肺癌患者首诊时已到中晚期,已失去手术机会[1]。化学治疗成为中晚期肺癌主要治疗措施[2]。目前临床上常常通过联合用药以增强化疗效果，但经常受限于化疗药物的副作用，化疗治疗失败很高，肺癌多药耐药(multidrug resistance，MDR)是被认为是导致化疗治疗失败的最主要原因之一[3]。而中药作为中国国粹药物，其“成本廉价、应用历史悠久、不良反应少、杀癌谱广、作用靶点较多、逆转多重耐药性”等优势。研究表明，消癌平可抑制癌细胞生长，并使细胞阻滞于G0/G1期，调控细胞周期相关蛋白，从而促进凋亡[4]。鉴于此，此次研究采用消癌平联合丝裂霉素(阻滞于细胞周期G0/G1)，监测其对肺癌A549细胞增殖，细胞周期、凋亡的影响，并以P53mRNA，CyclinD1 mRNA的为指标，探讨化疗增效机制。

1　材料与方法

1.1细胞株人肺腺癌细胞株 A549购中国科学院上海细胞库

1.2主要材料与试剂见表1。

表1　本研究所用之要材料与试剂

1.3方法

1.3.1采用MTT法检测消癌平联合丝裂霉素对肺癌A549细胞增殖的影响:取生长状态良好、处于对数期的肺癌A549细胞，常规消化，配成单细胞悬液,显微镜下计数，以每孔8 000～10 000个细胞接种于96孔培养板中,每孔100 μl。……