鸡β干扰素的原核表达及抗病毒活性检测

吴斯宇，黄健妮，崔 进，冯赛祥，欧阳国文，向程威，郭 旸，廖 明，焦培荣

（华南农业大学兽医学院 人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室，广州510642）

·研究论文·

鸡β干扰素的原核表达及抗病毒活性检测

吴斯宇，黄健妮，崔 进，冯赛祥，欧阳国文，向程威，郭 旸，廖 明，焦培荣

（华南农业大学兽医学院 人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室，广州510642）

根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡β干扰素基因序列进行密码子优化与人工合成，构建原核表达质粒pET-28b-ChIFN-β，重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达，产物主要以包涵体形式存在。包涵体进行变性、复性和镍柱亲和纯化后，SDS-PAGE、Western blot分析表明pET-28b-ChIFN-β表达正确，并且表达量较高。重组鸡β干扰素蛋白在DF-1细胞上能明显抑制水疱性口炎病毒繁殖，抗病毒活性达2.73×106UI/mg。本研究结果为鸡β干扰素在临床防治禽类病毒性疾病的探索奠定了基础。

鸡β干扰素； 原核表达； 抗病毒活性

干扰素（interferon，IFN）是一类重要的细胞因子，是由生物体细胞受到病毒或其他诱生剂的作用而产生的分泌性蛋白，具有抗病毒、抗肿瘤细胞增殖、免疫调节等多种生物学活性。与哺乳动物相似，鸡的干扰素也有α、β、γ三种类型。Sekellick等［1］1994年首次成功克隆和表达出了鸡干扰素基因。1995年Digby等［2］克隆出鸡γ干扰素基因。Sikc等［3］随后克隆出鸡β干扰素（chicken interferon-β，ChIFN-β）基因。近年来很多国内学者也开展了鸡干扰素的抗病毒研究。陈红英等［4］克隆出了罗曼鸡α干扰素基因，并通过原核表达获得了具有抗病毒活性的干扰素。……