RBBP4对前列腺癌细胞生长和侵袭能力的影响

黄亚强　黄红星　丘少鹏　黎卫　郑轶群　袁润强



·实验研究·

RBBP4对前列腺癌细胞生长和侵袭能力的影响

黄亚强黄红星丘少鹏黎卫郑轶群袁润强

目的研究视网膜母细胞瘤结合蛋白4(retinoblastoma binding protein4，RBBP4)对前列腺癌细胞侵袭、迁移、增殖及肿瘤生长等生物学行为的影响。方法构建RBBP4过表达慢病毒载体转染及未转染LNCaP、DU145细胞株，分别通过Transwell实验、Wound healing实验、CCK8及流式细胞技术检测前列腺癌细胞的侵袭、迁移、增殖和凋亡, 异体肿瘤种植模型研究RBBP4 对前列腺癌细胞成瘤能力的影响。结果RBBP4上调表达明显促进前列腺癌细胞的迁移(LNCaP: RBBP4 vs Ctrl =133.8±14.1 vs 48.6±11.9;DU145: RBBP4 vs Ctrl =118.2±10.5 vs 62.3±13.0,P<0.001)和侵袭(LNCaP: RBBP4 vs Ctrl =252.0±16.3 vs 82.5±12.6; DU145: RBBP4 vs Ctrl =232.8±9.2 vs 61.0±8.3，P<0.001)能力；RBBP4高表达可以刺激DU145前列腺癌细胞的增殖并显著加快DU145细胞移植瘤的生长速度(P<0.01)。结论RBBP4能刺激前列腺癌细胞的侵袭、迁移，促进前列腺癌的形成及生长。

前列腺癌；RBBP4；侵袭；肿瘤生长

前列腺癌是老年男性常见恶性肿瘤,随着我国人口的老龄化，前列腺癌已成为威胁我国老年男性生命的重要疾病[1]。前列腺癌细胞的侵袭力影响前列腺癌的进展及预后。前期基于蛋白组学的研究发现视网膜母细胞瘤结合蛋白4(retinoblastoma binding protein 4，RBBP4)在前列腺癌组织中的表达明显上调[2]，本研究拟进一步探讨RBBP4对前列腺癌细胞侵袭、增殖及肿瘤生长能力的影响。

材料与方法

一、材料

本研究所用的LNCaP和DU145前列腺癌细胞株均取自广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室，所有细胞株均在10%FBS、5%CO2、37℃条件下培养。CCK8试剂购自碧云天生物技术研究所。RBBP4慢病毒载体由美国SBI公司设计及构建。nu/nu裸鼠购自广东省动物实验中心。

二、方法

1.构建稳定传代的RBBP4过表达慢病毒载体转染细胞株和未转染细胞株：RBBP4过表达慢病毒载体(货号: PMIRHRBBP4PA-1/MZIPRBBP4-PA-1)，用包装质粒混合液转染RBBP4到293T细胞株，3 d后根据SBI说明书用Lenti-Concentin病毒沉淀溶液提取收集病毒颗粒。……