扶教龙,钱大伟,吴晨奇,徐敏强,胡翠英,李良智
(苏州科技大学化学与生物工程学院,江苏苏州215000)
高产辅酶Q10类球红细菌的化学诱变筛选及其发酵培养基优化
扶教龙,钱大伟*,吴晨奇,徐敏强,胡翠英,李良智
(苏州科技大学化学与生物工程学院,江苏苏州215000)
利用菌株对(维生素K3+叠氮化钠+对羟基苯甲酸)的复合抗性作为筛选标记,对产辅酶Q10的类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)使用亚硝基胍进行化学诱变,筛选高产菌株并采用响应面法优化其发酵培养基。结果表明,经诱变选育得到一株遗传稳定的辅酶Q10高产菌株R.sp3-7,其最佳发酵培养基组成为:葡萄糖31.7 g/L,玉米浆干粉5.6 g/L,(NH4)2SO45.3 g/L、谷氨酸钠3.0 g/L、NaCl 3.0 g/L、MgSO4·7H2O 12.5 g/L、KH2PO43.0 g/L、CaCO32.0 g/L、辅液1 mL/L。在此培养条件下,诱变菌株R.sp3-7的辅酶Q10产量达(93.63±0.59)mg/L,与出发菌株相比提高了116.8%。
辅酶Q10;抗性平板;化学诱变;响应面分析方法;类球红细菌
辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)广泛存在于高等动物线粒体内膜中的一种内源性物质,是呼吸链的重要递氢体,是生成三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的必需成分[1]。它具有抗氧化性、清除自由基、提高机体免疫力等功效,可预防和治疗多种疾病,在治疗心脏衰竭、延缓皮肤衰老等方面具有较广泛的应用[2-4]。因此,经济生产CoQ10的途径也变得尤为重要。目前,CoQ10的主要生产方法有:动植物提取法、植物细胞培养法、化学合成法和微生物发酵法。相比其他三种方法,微生物发酵法生产CoQ10具有分离过程相对简单、产品活性好、可规模放大生产能力等优点,成为最有发展潜力的CoQ10生产方法。要实现发酵法工业化生产CoQ10首先要解决的问题是获得一株高产菌株。……