多种分离方法分离脐血造血细胞效率的比较

王丹丹 林莹 武文杰 李茜

摘 要：目的：比较多种分离方法分离脐血造血细胞的效率。方法：依据随机方法将133例脐血标本分为3组，A组选择HES法，B组选择Ficoll法，C组选择明胶法。所有标本均进行CD34+细胞检测，同时进行造血祖细胞体外培养。结果：A组CD34+细胞产率明显高于B组，C组CD34+细胞产率明显高于B组，A组CD34+细胞产率明显C组，组间两两比较差异有统計学意义（P<0.05）；A组CFCs产率明显高于B组，C组CFCs产率明显高于B组，A组CFCs产率明显C组，组间两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：在分离脐血造血细胞过程中，HES法的分离效率高于HES法、明胶法。

关键词：脐血造血细胞；HES法；Ficoll法；明胶法；效率

脐血造血细胞分离是脐血移植过程中的重要环节，也是脐血库建立的关键性步骤，对血液病患者的疾病治疗有着重要的作用。目前，最常见的脐血造血细胞分离方法为HES法、Ficoll法、明胶法，其中HES法的分离效率较高，其体积浓缩效果较好。本研究将133例脐血标本分为3组，3组分别应用HES法、Ficoll法及明胶法，比较3组的分离效果，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

本研究共133例脐血标本，均由我市某医院妇产科提供，脐血标本采集量50.2-140.5ml，平均81.7ml。标本采集后保存于4℃的温度条件下，保存时间控制在24h之内。依据随机方法，将133例脐血标本分为3组，A组45例，B组44例，C组44例。

1.2 方法

1.2.1 HES法

A组45例标本选择HES法，即在整份脐血中加入25%的羟乙基淀粉60g/L，混合均匀后进行500r/min离心处理，时间控制在5min，之后去掉红细胞，再进行1200r/min离心处理，时间控制在13min，将部分血浆去掉，确保体积浓缩至25ml左右，最后将白细胞重悬在剩余的血浆中。

1.2.2 Ficoll法

B组44例标本选择Ficoll法，即选择Ficoll 10ml，相对密度为1.077，将其置于离心管（50ml）中。每例标本取10ml脐血，并置于液面上，之后进行1800r/min离心处理，时间控制在10min，选择白细胞层重悬在RPMI 1640培养液10ml中。……