纪世琪,孙志伟,韩志兴,张海建, 程文龙, 赵玉千
(1.首都医科大学附属北京地坛医院泌尿外科,北京 100015;2.首都医科大学公共卫生学院,北京 100069)
·基础研究·
shRNA靶向抑制CD74基因对人肾透明细胞癌细胞786-O生物学行为的影响
纪世琪1,孙志伟2,韩志兴1,张海建1, 程文龙1, 赵玉千1
(1.首都医科大学附属北京地坛医院泌尿外科,北京100015;2.首都医科大学公共卫生学院,北京100069)
目的探讨抑制人CD74基因后对肾透明细胞癌786-O细胞生长和侵袭能力的影响。 方法通过慢病毒lentivirus-CD74转染肾透明细胞癌786-O细胞后,MTT法检测786-O细胞活力的变化,利用流式细胞学检测肿瘤细胞的凋亡变化情况,Transwell小室实验检测786-O细胞侵袭能力改变情况,采用Westernblot方法检测转染前后786-O细胞CD74及相关蛋白的变化情况。结果慢病毒转染786-O细胞后细胞中CD74蛋白水平表达明显低于对照组(P<0.05),抑制CD74蛋白表达水平后786-O细胞生长明显受到抑制,细胞活力降低,凋亡增加,细胞侵袭能力降低,且Survivin、MMP-2、MM-9蛋白也随之下降,其与对照组结果对比差异具有统计学差异(P<0.05)。结论利用慢病毒转染技术抑制CD74的表达可以抑制肾透明细胞癌786-O细胞的增值和侵袭能力,CD74基因可能作为癌基因在肾透明细胞癌中起作用。
肾癌;肾透明细胞癌;CD74;增值;侵袭
CD74蛋白开始研究是作为一种Ⅱ类主要组织相容性复合物(major histoeompatibility complex classⅡ, MHCⅡ)相关的Ⅱ型跨膜糖蛋白被发现的。CD74蛋白生理条件下主要表达于单核细胞、树突状细胞、巨噬细胞、胃肠道黏膜上皮细胞及活化B细胞等抗原递呈细胞 (antigenpresentingcell,APC)[1]。作为MHCⅡ类分子的蛋白伴侣,CD74蛋白于机体免疫过程的抗原递呈反应中发挥着重要作用,同时CD74还可作为MIF蛋白的高亲和受体,CD74蛋白参与调控由MIF触发的各种细胞信号通路,并对细胞与细胞、细胞与基质间(特别是肿瘤细胞)的黏附、转移过程均参与表达调控。最新有研究发现CD74蛋白除了能参与机体免疫反应外,在许多肿瘤中均有表达上调,如……