冷冻保护剂添加-去除过程对猪M II期卵母细胞损伤研究

杨云周新丽戴建军张德福邵文琪衣星越陶乐仁

（1上海理工大学生物热科学研究所 上海 200093；2上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海 201106）

冷冻保护剂添加-去除过程对猪M II期卵母细胞损伤研究

杨云1周新丽1戴建军2张德福2邵文琪1衣星越1陶乐仁1

（1上海理工大学生物热科学研究所 上海 200093；2上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海 201106）

在卵母细胞的低温保存过程中，冷冻保护剂的添加与去除是一个必不可少的步骤，但高浓度的冷冻保护剂会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤。为研究冷冻保护剂添加与去除过程对猪MII期卵母细胞的损伤，本文采用传统的方法（一步法、两步法）来添加和去除冷冻保护剂，探究冷冻液、解冻液、稀释液对细胞存活率的影响。实验结果表明:在冷冻保护剂添加-去除过程中，卵母细胞的渗透损伤主要发生在卵母细胞从冷冻液转移至解冻液，以及保护剂去除阶段；解冻液浓度与平衡时间对卵母细胞存活率有很大影响；卵母细胞保护剂的去除与添加过程是相关的，解冻液浓度和平衡时间的选择依赖于细胞在冷冻液中的浓度和平衡时间。此研究结果将为猪MII期卵母细胞的低温保存方案提供参考。

低温保存；冷冻保护剂；渗透损伤；卵母细胞

自从1986年Chen C［1］首次成功地冷冻保存人的卵母细胞并受精后获得后代以来，卵母细胞的低温保存一直是低温生物医学界的热点课题，该技术的发展在人类辅助生殖及生物胚胎技术领域有着广阔的应用前景［2-3］。……