miRNA211在人皮肤黑素瘤的表达及功能研究

徐妍 董达科 华海康 朱小红

214002 江苏，无锡市第二人民医院肿瘤科（徐妍），皮肤科（董达科、华海康、朱小红）

miRNA211在人皮肤黑素瘤的表达及功能研究

徐妍 董达科 华海康 朱小红

214002 江苏，无锡市第二人民医院肿瘤科（徐妍），皮肤科（董达科、华海康、朱小红）

目的探讨miRNA211（miR⁃211）在恶性黑素瘤进展过程中的表达以及靶分子MMP⁃16与miR⁃211表达的相关关系。方法实验分阴性对照组、空载体对照组、miR⁃211过表达组。TaqMan荧光定量PCR检测miR⁃211在黑素细胞、黑素瘤细胞的表达，以及在痣、黑素瘤组织中的表达。SRB试验和流式细胞仪分别检测细胞增殖和细胞周期分布。甲基纤维素克隆形成试验和Transwell迁移试验研究细胞克隆形成和细胞迁移。用集落大小衡量克隆形成力，而同一迁移距离下的相对细胞数用来衡量细胞迁移能力。TaqMan荧光定量PCR检测比较miR⁃211表达增加前后MMP⁃16 mRNA表达的变化。结果miR⁃211在黑素瘤细胞G361、C32和A375表达量分别是0.09± 0.02，0.000 52±0.000 20，0.000 03±0.000 01（F=10410，P＜0.01）。miR⁃211在黑素瘤标本的表达量（0.17±0.03）显著低于痣的表达量（0.87±0.08），t=9.118，P＜0.01。在体外，miR⁃211表达上调的黑素瘤细胞miR⁃211过表达组与阴性对照组及空载体对照组比较，细胞增殖与细胞周期分布，差异无统计学意义。miR⁃211过表达组、空载体对照组的克隆形成力分别是0.49±0.05、0.85±0.09，两组比较，差异有统计学意义（t=2.19，P＜0.05）。miR⁃211过表达组、空载体对照组的克隆形成力分别是0.49±0.06、0.82±0.09，两组比较，差异有统计学意义（t=3.15，P＜0.05）。而空载体对照组与阴性对照组比较，差异无统计学意义。转染miR⁃211 mimics后24 h，在miR⁃211过表达组和空载体对照组的MMP⁃16 mRNA水平比较分别是0.33±0.02和0.91±0.03，两组比较，t=11.30，P＜0.01；48 h分别是0.52±0.01和0.96±0.02，两组比较，t=5.02，P＜0.05；72 h分别是0.71±0.01和0.97±0.03，两组比较，t=3.85，P＜0.05。空载体对照组与阴性对照组在3个时间点的比较，差异均无统计学意义。……