毛蕊花糖苷固体分散体制备工艺研究

冯文彬，臧林泉，潘雪刁，许国庆，戴虹，杨智承

（1.广东省惠州市第二妇幼保健院，广东惠州516300；2.广东药科大学，广东广州646000）

毛蕊花糖苷固体分散体制备工艺研究

冯文彬1，臧林泉2，潘雪刁2，许国庆1，戴虹1，杨智承2

（1.广东省惠州市第二妇幼保健院，广东惠州516300；2.广东药科大学，广东广州646000）

目的制备毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188固体分散体，提高毛蕊花糖苷的溶出度，以提高其生物利用度。方法采用熔融法制备固体分散体，考察药物和载体的比例、熔融温度、冷却温度对溶出度的影响，比较固体分散体和物理混合物的溶出度。结果制成固体分散体的药物溶出度在一定程度上随载体比例增加而增加。当药物和载体比例达到1∶11时，药物的溶出度增大最明显。结论制备毛蕊花糖苷固体分散体的药物溶出度有显著提高。

毛蕊花糖苷；泊洛沙姆188；固体分散体；溶出度；熔融法

毛蕊花糖苷（VER），又名麦角甾苷、类叶升麻苷，是苯乙醇苷类中最早被发现的一种物质，也是分布于自然界最广泛的苯乙醇苷类物质，广泛存在于双子叶植物中。大量研究表明，毛蕊花糖苷具有调节免疫［1］、抗骨质疏松［2］、保护肝脏［3］、补肾壮阳［4］、增强记忆力［5］等药理作用。但其水溶性和脂溶性均较差，导致体内吸收差，生物利用度低，给临床应用带来一定困难。

固体分散体技术是提高难溶性药物溶出度的有效方法之一［6-7］，笔者以泊洛沙姆188为载体材料，采用熔融法制备毛蕊花糖苷固体分散体，并进行体外溶出度试验，为进一步制备理想的毛蕊花糖苷制剂奠定基础。

1　仪器与试药

1.1仪器

UV-2450型紫外-可见分光光度计（日本岛津公司）；BP110S型电子天平（德国赛多利斯集团）；RC806型溶出试验仪（天津市天大天发科技有限公司）；AS20500A型超声波清洗器（天津奥特赛仪器有限公司）；TYHW型电热套（巩义市英峪予华仪器厂）。

1.2试药

毛蕊花糖苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为111530～200303，纯度99.5%，供含量测定用）；毛蕊花糖苷原料药（上海鼓臣生物技术有限公司，批号为13051112，纯度99.3%）；泊洛沙姆188（巴斯夫上海有限公司，纯度99%，批号为WPMD518B）；无水乙醇、乙醇（天津市化学试剂一厂，分析纯）；盐酸（广州化学试剂厂，分析纯）；十二烷基硫酸钠（SDS，上海星天外贸有限公司，分析纯）；纯化水（实验室自制）。

2　方法与结果

2.1检测波长确定

称取毛蕊花糖苷与泊洛沙姆188适量，分别溶于甲醇中，在200～400 nm波长处扫描其紫外吸收情况。结果毛蕊花糖苷在334 nm波长处有最大吸收峰，而泊洛沙姆188在200～400 nm波长范围内无吸收，故选择334 nm作为毛蕊花糖苷的检测波长。

2.2热稳定性研究

称取毛蕊花糖苷原料药0.3 g，精密称定，连续恒温干燥12 h后，考察其含量变化，干燥温度选取60，70，80℃。经测定，毛蕊花糖苷在3个温度点的含量变化在±0.1%之内。故当熔融温度为60～80℃时，并不影响毛蕊花糖苷的稳定性。

2.3熔融法制备固体分散体［8］

准确称量一定量的泊洛沙姆188于小烧杯中，在一定温度条件下加热熔融，按毛蕊花糖苷与泊洛沙姆188不同的质量比例（分别为5∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶3，1∶5，1∶7，1∶11，1∶13，1∶15，1∶17，1∶19，1∶27，1∶31）少量多次地加入适量的毛蕊花糖苷，继续加热至混合物呈澄明状态，立即置冰箱内，冷却固化，继续放置，使之脆化后，放在干燥器内干燥数日，取出，得到毛蕊花糖苷固体分散体。

试验结果显示，当毛蕊花糖苷与泊洛沙姆188的质量比例为5∶1，3∶1，2∶1，1∶1时，两者的比例不符合低共溶物的比例，不可以完全融合而全部形成固体分散体，故排除此系列载体比例，仅制备药载比例为1∶3，1∶5，1∶7，1∶9，1∶11，1∶13，1∶15，1∶17，1∶19，1∶27，1∶31的固体分散体。

2.4含量测定

2.4.1色谱条件［9-11］

色谱柱：DiamonsilC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.1%醋酸溶液（16∶84）；流速：1.0 mL/min；检测波长：334 nm；柱温：30℃；进样量：10 μL。

2.4.2溶液制备

对照品溶液：精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，用甲醇配制成每1 mL含毛蕊花糖苷50.35 μg的溶液，即得。

供试品溶液：精密称取药物与载体比例为1∶17的毛蕊花糖苷固体分散体适量，用甲醇配制成每1 mL含毛蕊花糖苷50.29 μg的溶液，即得。

阴性对照品溶液：按毛蕊花糖苷固体分散体的工艺制备不含毛蕊花糖苷的阴性对照制剂，按供试品溶液项下方法制备阴性对照品溶液。

2.4.3方法学考察

专属性试验：在上述色谱条件下，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照品溶液各10 μL，注入色谱仪。由图1可见，阴性对照品溶液在毛蕊花糖苷对应的色谱峰处无吸收峰，对毛蕊花糖苷出峰无干扰，表明该方法专属性良好。

线性关系考察：精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，分别稀释成每1 mL含毛蕊花糖苷5，10，20，40，70，100 μg的系列溶液，按2.4.1项下色谱条件分别进样测定，记录色谱图。以毛蕊花糖苷质量浓度（C，μg/mL）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，得回归方程A=50 893 C-544 297，r=0.999 9（n=6）。结果表明，毛蕊花糖苷对照品溶液质量浓度在5～50 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液，重复测定6次。结果的RSD为0.59%（n=6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，4，8，12，20，24 h时按2.4.1项下色谱条件进样，测定毛蕊花糖苷的峰面积。结果的RSD为1.31%（n=6），表明供试品溶液在24 h内稳定。

图1　高效液相色谱图

图2　不同载体-药物比例的SDS对不同时间点溶出度影响

2.5固体分散体溶出度的检测

按照2010年版《中国药典（二部）》附录ⅩC溶出度测定第一法篮法，介质为900 mL人工胃液（超声脱气），维持温度（37±0.5）℃，转速50 r/min，溶出介质中加入0.2%的SDS，进行药物溶出试验，每隔一定时间取溶出液适量（同时补加等体积等温度的新鲜介质），经0.45 μm微孔滤膜滤过后，取续滤液。按2.3项下方法，不同药载比例的固体分散体对不同时间点溶出度的影响见图2。可见，毛蕊花糖苷固体分散体的溶出度均有所提高，其中毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188=1∶1～1∶5，固体分散体在120 min内溶出度在46%以内；毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188=1∶7～1∶15，固体分散体在120 min时溶出度在76%左右；毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188=1∶17～1∶27，固体分散体在120 min溶出度在90%以上；毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188=1∶31，固体分散体在120 min时溶出度仅78%。

2.6熔融温度对溶出度的影响

称取药物与载体比例为1∶17的固体分散体适量，熔融温度分别设为60，70，80℃，冷却温度为0℃，制备不同熔融温度的固体分散体。按2.5项下方法进行溶出度试验，熔融温度对溶出度的影响见图3。可见，熔融温度对溶出度影响较小，为确保药物稳定性，设为60℃。

图3　熔融温度对溶出速率的影响

2.7冷却温度对溶出度的影响

称取药物与载体比例为1∶17的固体分散体适量，熔融温度为60℃，冷却温度为-20，0，20℃，制备不同的固体分散体。按2.5项下方法进行溶出度试验，冷却温度对溶出度的影响见图4。可见，15 min时冷却温度对溶出度影响较大，先在-20℃的冰盐浴中骤冷成固体的分散体，在15 min时溶出度会造成突释。冷却温度较低，即冷却速率较快，则颗粒或晶体的粒径较小，溶出较快，但总溶出度并未明显提高。综合考虑，冷却温度选用0℃。

2.8药物-载体物理混合物及固体分散体溶出度比较

制成固体分散体后，药载比例为1∶17的毛蕊花糖苷固体分散体在溶出30 min时，溶出度提高了近2.5倍，证明制备的产物为固体分散体，而非机械混合物。1∶17固体分散体和1∶17物理混合物的溶出度曲线见图5。另外，比例为1∶1的物理混合物在120 min时，溶出度仅约为44%，与毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188=1∶1～1∶5的固体分散体在120 min的溶出度十分接近。这说明，毛蕊花糖苷-泊洛沙姆188的比例为1∶5的固体分散体有可能因为比例不恰，无法制成均匀分散的固体分散体，从而无法达到增溶的目的。

3　讨论

泊洛沙姆188的固体形态是用于制备固体分散体的基础，熔点较低是熔融法制备固体分散体的基础，亲水性好是其提高药物溶出率的基础［12］。当用泊洛沙姆188固体分散体制备的制剂进入人体胃肠道后，泊洛沙姆188的表面活性、与皮肤黏膜的相容性及延缓胃肠道蠕动的性质会进一步增加药物的吸收［13］。本试验中以泊洛沙姆188为载体，采用熔融法制备毛蕊花糖苷固体分散体，可显著提高毛蕊花糖苷的溶出性能。毛蕊花糖苷固体分散体制备工艺简单，成本较低，具有潜在的应用价值。

将毛蕊花糖苷制备成固体分散体后，毛蕊花糖苷在溶出介质中的溶出度显著提高，主要有以下3方面原因：1）药物以无定形形式存在于载体当中，具有较高能量［14-15］。在不断搅拌下，熔融态的毛蕊花糖苷分子均匀的分布于载体表面，或是载体内部空隙当中，经迅速冷却后，药物以非晶态分散于载体当中。当载体材料与溶出介质接触时，药物可快速溶出。2）载体材料提高了药物的润湿性，载体材料为强吸水性材料，可提高溶出介质对药物的润湿作用。3）载体材料保证了药物的高度分散性，使药物分子不易形成聚集体，故溶出度显著提高。

固体分散体中药物主要以分子、无定形态或微晶等形态存在，从热力学角度来看，这些体系处于不稳定状态，有转化为稳定结晶态的趋势［16］。因此，很多固体分散体长期贮存后会出现硬度增加、晶体析出或结晶粗化，从而导致药物溶出度下降、生物利用度降低，故设计处方、制备方法、工艺和贮存条件等对固体分散体的质量影响较大，应加以重视并不断优化，否则易发生老化现象，降低药物溶出度。

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Study on Preparation of Verbascoside Solid Dispersion

Feng Wenbin1，Zang Linquan2，Pan Xuediao2，Xu Guoqing1，Dai Hong1，Yang Zhicheng2
（1.Huizhou Second Women′s And Children′s Healthcare Hospital，Huizhou，Guangdong，China516300；2.GuangdongPharmaceutical University，Guangzhou，Guangdong，China64600）

ObjectiveTo prepare verbascoside-poloxamer 188 solid dispersions in order to increase the dissolution rate of verbascoside and improve its bioavailability.MethodsThe melting method was used to prepare solid dispersion.The effect of the ratio of the drug to poloxamer 188，melting temperature and cooling temperature were explored，and the dissolution of solid dispersion and physical mixture were compared.ResultsIn a certain extent，with the increase of the carrier ratio，the drug release of the prepared solid dispersions increased.When the ratio of the drug to poloxamer 188rose to 1∶11，the dissolution rate of the drug increased most obviously. ConclusionThe dissolution rate of prepared verbascoside solid dispersion has improved significantly.

verbascoside；poloxamer 188；solid dispersion；dissolution；melting method

TQ461；R284.1；R282.71

A

1006-4931（2016）18-0039-04

（2016-03-10；

2016-04-28）