花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因启动子的克隆及功能分析

石 磊 苗利娟 齐飞艳 张忠信 高 伟 孙子淇 黄冰艳 董文召汤丰收 张新友

河南省农业科学院经济作物研究所 / 农业部黄淮海油料作物重点实验室 / 河南省油料作物遗传改良重点实验室 / 花生遗传改良国家地方联合工程实验室, 河南郑州 450002

花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因启动子的克隆及功能分析

石 磊 苗利娟 齐飞艳 张忠信 高 伟 孙子淇 黄冰艳 董文召汤丰收 张新友*

河南省农业科学院经济作物研究所 / 农业部黄淮海油料作物重点实验室 / 河南省油料作物遗传改良重点实验室 / 花生遗传改良国家地方联合工程实验室, 河南郑州 450002

Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶(SAD)是决定植物体内饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸比值的关键酶。以花生品种豫花9326基因组DNA为模板, 通过基因组步移技术, 克隆到花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(AhSAD)起始密码子ATG上游720 bp片段, 利用5′ RACE方法获得了该基因的5′ UTR序列, 通过序列比对确定720 bp片段为AhSAD启动子区域。PLACE在线启动子预测分析表明, 该序列具有真核生物启动子必需的核心元件TATA-box和CAAT-box, 含有多个与光诱导和激素响应相关顺式序列元件。将AhSAD启动子片段替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达, 构建植物表达载体pBI-PAhSAD。通过农杆菌介导法转化拟南芥和在花生不同组织中瞬时表达, 利用GUS组织化学染色研究其表达特性。表明在拟南芥和花生受体中, AhSAD启动子主要调控下游基因在根、茎、叶片和子叶中表达, 在花生的果针中也检测到GUS活性; 拟南芥的茎生叶只有叶脉中具有GUS活性, 而花生整个叶片中都具有GUS活性。……