海州香薷不同抗性种群液泡转化酶基因EhvINV序列趋异及表达差异分析

2016-11-09 02:22:47蔡深文徐仲瑞熊治廷3王加真陈瑶
生物技术通报 2016年10期

蔡深文徐仲瑞熊治廷,3王加真陈瑶

(1. 遵义师范学院资源与环境学院,遵义 563002;2. 武汉大学资源与环境科学学院,武汉 430079;3. 生物质资源化学与环境生物技术湖北省重点实验室,武汉 430079;4. 遵义师范学院生命科学学院,遵义 563002)

海州香薷不同抗性种群液泡转化酶基因EhvINV序列趋异及表达差异分析

蔡深文1,3徐仲瑞2熊治廷2,3王加真4陈瑶4

(1. 遵义师范学院资源与环境学院,遵义 563002;2. 武汉大学资源与环境科学学院,武汉 430079;3. 生物质资源化学与环境生物技术湖北省重点实验室,武汉 430079;4. 遵义师范学院生命科学学院,遵义 563002)

根据GenBank中海州香薷(Elsholtzia haichowensis)液泡转化酶基因EhNvINV(JX500755)和EhCvINV(JX500756)的序列设计特异性引物,克隆cDNA全长序列,并通过生物信息学分析基因及推导的蛋白序列,利用SWISS-MODEL进行同源建模,并与蔗糖分子进行模拟对接,实时荧光定量PCR分析EhNvINV和EhCvINV在铜胁迫下的转录表达。结果表明,海州香薷非抗性和抗性种群液泡转化酶蛋白EhNvINV和EhCvINV在114和346处存在氨基酸趋异位点,模拟3D结构相似,仅在趋异位点Glu114/ Gln114和Leu346/Pro346处有差别。EhNvINV、EhCvINV和模拟突变体(EhNvINV-E114Q和EhNvINV-L346P)与蔗糖分子对接形成的活性中心构象基本一致,但在空间位置上存在细微差异。实时荧光定量PCR结果表明铜胁迫7 d后,EhCvINV的表达受铜的诱导,而EhNvINV受铜的抑制。

海州香薷;液泡转化酶;铜胁迫;转录表达

DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.10.021

生长在重金属污染土壤中的植物,其生长受重金属的胁迫,为了维持正常生长代谢和重金属抗性机制,必须获得足够的碳源和能量。在大多数高等植物中,产自叶的光合同化物以蔗糖的形式经韧皮部转运到各个库器官中[1]。……

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