黄芩ICS基因部分编码序列的克隆及其对水杨酸含量影响的研究

苏 虎 朱友林 李 蓉 吴 超 张 芸

(1.南昌大学生命科学学院，南昌 330031； 2.江西科技师范大学生命科学学院，南昌 330013)

黄芩ICS基因部分编码序列的克隆及其对水杨酸含量影响的研究

苏 虎1,2朱友林1*李 蓉2吴 超2张 芸2

(1.南昌大学生命科学学院，南昌 330031；2.江西科技师范大学生命科学学院，南昌 330013)

以黄芩为实验材料，利用PCR克隆了其异分支酸合成酶(Isochorismate synthase,ICS)基因的部分编码序列，利用该序列构建了病毒诱导的基因沉默(Virus induced gene silence,VIGS)载体pTRV2-VIGSics，对黄芩ICS基因进行了沉默；测定了沉默后ICS基因的表达水平及ICS酶活性，研究了ICS基因沉默对黄芩水杨酸(Salicylic acid,SA)含量的影响，以及干旱胁迫对沉默材料ICS基因表达水平、酶活性和SA含量的影响。结果表明VIGS沉默处理使ICS表达水平显著降低，为对照组的25%，ICS酶活性未检测到，黄芩SA含量为对照组的44.4%；干旱胁迫下ICS表达水平和酶活性有所恢复，分别为对照组的87%和4.95%，黄芩SA含量没有恢复，而是降低至了对照组的13.2%。

黄芩；异分支酸合成酶；水杨酸；病毒诱导的基因沉默

中草药品质受到自身所合成的药效成分含量高低的影响，由中草药次生代谢所产生的一些产物是其主要药效成分。植物中这些次生代谢产物功能之一是协助其抵御或适应外界不良条件[1]，在该过程中相关防御基因被激活，使得相应次生代谢产物累积水平发生改变。水杨酸(Salicylic acid,SA)能够激活相关防御基因[2]，通过对依赖于SA的次生代谢途径进行调控可改变相应次生代谢产物合成水平[3]。在植物体内主要存在两条SA合成途径，即PAL(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)途径和ICS(Isochorismate synthase,ICS)途径(图1)。……