基于PKS Ⅰ基因海芦笋内生真菌及其次级代谢产物筛选鉴定

张俊楠，彭 洁，刘天行,2，辛志宏,*

基于PKS Ⅰ基因海芦笋内生真菌及其次级代谢产物筛选鉴定

张俊楠1，彭 洁1，刘天行1,2，辛志宏1,*

（1.南京农业大学食品科技学院，江苏 南京 210095；2.南京农业大学图书馆，江苏 南京 210095）

一般研究内生真菌的方法都无法预测内生真菌次级代谢产物的类型，本实验以Ⅰ型聚酮合成酶（polyketide synthase，PKS）基因为探针，野生海芦笋（Salicornia bigelovii Torr.）为原料，筛选出菌株Salicorn 3，并对其发酵产物中的化合物进行分离鉴定。结果表明：经过ITS1-5.8S-ITS4 rDNA同源序列鉴定的菌株Salicorn 3为圆弧青霉（Penicillium cyclopium），通过系统发育树分析并结合文献数据比较，表明该菌株具有产生聚酮类化合物的潜力。通过常压硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析从其发酵产物中分离得到两个单体化合物，采用核磁共振和电喷雾质谱鉴定其化学结构分别为二酮哌嗪生物碱和脑苷脂C。

海芦笋；内生真菌；Ⅰ型PKS基因；聚酮类化合物；核磁共振

植物内生真菌是指那些寄生在健康植物的根茎叶部位，在宿主的组织器官或细胞内完成其部分或全部生活周期并对寄主植物不产生明显病害症状的一类真菌[1-2]。1993年，Strobel等[3]从太平洋短叶紫杉中分离出了一株内生真菌，该菌能够产生独特的抗癌活性物质——紫杉醇，由此启发人们从植物内生真菌中探索寻找出更多的生物活性物质。此后，大量结构新颖、活性多样的内生真菌次级代谢产物被相继发现，有些化合物已经被广泛应用于医药、工业和农业。

一般研究内生真菌的方法包括化学筛选、活性筛选或者化学与活性结合筛选，但是这些筛选方法都无法准确预测内生真菌次级代谢产物的类型，难以实现以化学结构为导向的定向筛选。……